Phospho-TIFA-T9 Conejillo pAb para WB y ELISA - Q96CG3

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de TIFA

• TIFA (Proteína A que interactúa con TRAF que contiene dominio FHA) también se conoce como T2BP, T6BP, TIFAA, PM14 y proteína activadora de NF‑kappa‑B 20. Contiene un dominio forkhead‑associated (FHA) que media interacciones dependientes de fosforilación.
• TIFA actúa como una molécula adaptadora que juega un papel clave en la activación de la señalización proinflamatoria de NF‑kappa‑B tras la detección de patrones moleculares asociados a patógenos bacterianos (PAMPs). Referencias relacionadas: PMID:12566447, PMID:15492226, PMID:26068852
• Tras la detección de ADP‑heptosa (un PAMP bacteriano) por la quinasa ALPK1, ALPK1 fosforila TIFA en Thr‑9, lo que lleva a su homooligomerización. Referencias relacionadas: PMID:30111836
• TIFA fosforilada y oligomerizada promueve la oligomerización y poliubiquitinación de TRAF6, lo que a su vez activa TAK1 e IKK, impulsando la transcripción mediada por NF‑kappa‑B de citocinas.
• TIFA se localiza predominantemente en el citoplasma, consistente con su papel en transmitir señales desde sensores citoplasmáticos de patógenos a cascadas de quinasas aguas abajo.
• Modificación postraduccional: la fosforilación en Thr‑9 es el evento crítico que inicia la autoasociación y la función de señalización de TIFA.
• Palabras clave de UniProt: Estructura-3D, Citoplasma, Inmunidad, Inmunidad innata, Fosfoproteína, Proteoma de referencia.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético fosforilado que rodea Thr‑9 de la TIFA humana; por lo tanto, se espera que el anticuerpo reconozca específicamente la forma fosforilada en Thr‑9. Para western blotting, incluya inhibidores de fosfatasas durante la preparación de la muestra y considere usar un control de desfosforilación para confirmar la especificidad.
• Para aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede usarse como reactivo de captura o detección; valide el emparejamiento con anticuerpos secundarios apropiados y optimice las condiciones de recubrimiento para su formato de antígeno.
• Un control positivo para la fosforilación de TIFA puede generarse tratando células con ADP‑heptosa o sobreexpresando ALPK1, lo que induce potente la fosforilación de Thr‑9.
• Dado el bajo peso molecular de TIFA (21 kDa), use geles de SDS‑PAGE de alto porcentaje (12–15%) para una separación y transferencia óptimas.

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