Anticuerpo Monoclonal de Conejo Fosfo-Ubiquitina (Ser65) para WB, IF/ICC, ELISA - P62979 / P62987 / P0CG47 / P0CG48

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Ubiquitina

• La ubiquitina es una proteína de 76 aminoácidos altamente conservada, a menudo expresada como una proteína de fusión con la proteína ribosomal eS31 (gen RPS27A) y escindida para generar ubiquitina libre y el componente ribosomal.
• La ubiquitina puede conjugarse a proteínas diana mediante enlaces isopeptídicos, formando monómeros o cadenas de poliubiquitina enlazadas a través de diferentes residuos de lisina; las cadenas enlazadas por Lys‑48 dirigen las proteínas a la degradación proteasómica, mientras que las cadenas enlazadas por Lys‑63 median la endocitosis, la reparación del ADN y la señalización NF‑κB.
• Como parte de la subunidad ribosomal 40S, la proteína de fusión ubiquitina‑ribosomal participa en la biogénesis de los ribosomas y el procesamiento del pre‑rRNA dentro del nucléolo. Referencias relacionadas: PMID:9582194, PMID:23636399, PMID:34516797
• La ubiquitina sufre diversas modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, acetilación y ADP‑ribosilación, que modulan sus funciones celulares.
• La proteína de fusión también actúa como una proteína ribosomal de unión a zinc, que contiene un motivo de dedo de zinc de tipo C4.
• La localización subcelular incluye el citoplasma, el núcleo y el nucléolo, lo cual es consistente con sus funciones tanto en la degradación de proteínas citosólicas como en el ensamblaje de ribosomas nucleares.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Debido a la naturaleza lábil de la fosforilación, incluya inhibidores de fosfatasas durante la preparación de la muestra para preservar el epítopo fosfo‑Ser65.
• Verifique la especificidad del anticuerpo mediante el tratamiento de los lisados con fosfatasa o mediante competición con un péptido no fosforilado.
• Se pueden detectar múltiples bandas porque la ubiquitina se conjuga a numerosas proteínas diana; los pesos moleculares predichos incluyen la ubiquitina libre (~8,5 kDa) y conjugados de mayor peso molecular (bandas observadas en ~15, 18, 26 y 77 kDa).
• Para inmunofluorescencia, optimice las condiciones de fijación y permeabilización para retener la señal de fosforilación.

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