pAb de conejo contra Vimentina fosforilada S56 para WB y ELISA - P08670

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la Vimentina

• La vimentina es una proteína de filamento intermedio de tipo III codificada por el gen VIM, expresada predominantemente en células mesenquimales y ampliamente utilizada como marcador de transición epitelial-mesenquimal (TEM).
• Los filamentos de vimentina conectan el núcleo, el retículo endoplásmico y las mitocondrias, cumpliendo un papel clave en el mantenimiento de la citoarquitectura y facilitando el posicionamiento de organelos durante la migración celular direccional.
• La vimentina interactúa con LARP6 para estabilizar los ARNm de colágeno de tipo I (COL1A1 y COL1A2), contribuyendo a la producción de matriz extracelular y la fibrosis tisular.
• La proteína sufre extensas modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación, acetilación y ubiquitinación; la fosforilación en Ser-56 (objetivo de este anticuerpo) está implicada en la regulación de la dinámica de ensamblaje/desensamblaje de filamentos.
• Su localización subcelular es principalmente citoplasmática y citoesquelética, con poblaciones adicionales en la matriz nuclear, la membrana celular y los axones neuronales, lo que refleja sus diversas funciones biológicas.
• La expresión tisular es alta en fibroblastos y ciertas células inmunitarias, con niveles variables en líneas celulares cancerosas; la vimentina se encuentra frecuentemente sobreexpresada en tumores metastásicos y derivados de mesénquima.

Guía experimental y consejos técnicos

• Incluya siempre inhibidores de fosfatasas en los buffers de lisis durante la preparación de muestras para preservar la señal de fosforilación en S56.
• Valide la especificidad del anticuerpo tratando las muestras con λ-fosfatasa o usando controles positivos con inhibidores de fosfatasa; la pérdida de señal después de la desfosforilación confirma la especificidad por la forma fosforilada.
• Para Western blot, ejecute una electroforesis en gel SDS-PAGE reductora y transfiera a una membrana de PVDF o nitrocelulosa; la banda esperada es de ~54 kDa (puede presentar un ligero desplazamiento dependiendo del estado de fosforilación).
• Este anticuerpo también es apto para ELISA; optimice las condiciones de recubrimiento y los reactivos de detección de acuerdo al formato de ensayo específico que utilice.
• Se informa reactividad cruzada para humanos y ratas; si utiliza otras especies, realice una validación interna debido a posibles variaciones de secuencia alrededor del sitio de fosforilación.

CamelBio: Su puente de abastecimiento integral

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