Anticuerpo monoclonal de conejo Phospho-ZAP70-Y493 - P43403

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de ZAP70

• ZAP70 (Tirosina-proteína quinasa ZAP-70), también conocida como quinasa de tirosina relacionada con Syk, es una proteína citoplasmática de 70 kDa que pertenece a la familia de quinasas Syk.
• Desempeña un papel fundamental en la inmunidad adaptativa al regular la señalización del receptor de células T y B, afectando la motilidad, la adhesión, la expresión de citoquinas y el desarrollo de timocitos.
• Tras la unión del TCR, ZAP70 es reclutada hacia los motivos ITAM fosforilados de CD3E y CD247/CD3Z en la membrana plasmática, lo que alivia su autoinhibición y conduce a la activación (PubMed:7509083). Referencias relacionadas: PMID:7509083
• La ZAP70 activada fosforila las proteínas adaptadoras clave LAT y LCP2, ensamblando complejos de señalización que impulsan la producción de linfocinas, la proliferación de células T y la diferenciación.
• ZAP70 también modula la dinámica del citoesqueleto, la adhesión y la movilidad de las células T, y participa en la regulación a la baja del TCR al promover la internalización y degradación de CD247/CD3Z a través de CBL y las proteínas adaptadoras SLA/SLA2.
• La localización subcelular es principalmente citoplasmática y en la membrana celular, con expresión restringida a células T, células asesinas naturales, timocitos tempranos y células pro/pre B.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación (crítica para la actividad), acetilación y ubiquitinación; la proteína presenta dominios SH2, un dominio quinasa de unión a ATP y múltiples sitios de fosforilación.

Guía experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo se dirige al sitio de fosforilación en Tyr493, un residuo crítico para la activación de ZAP70; considere usar inhibidores de fosfatasas durante la preparación de la muestra para preservar el epítopo fosfo.
• Para IF/ICC, valide la especificidad de la tinción usando un bloqueo con péptido no fosforilado o tratando las células con una fosfatasa para confirmar la pérdida de señal.
• Este anticuerpo es adecuado para ELISA; al adaptarlo a otros inmunoensayos, realice una titulación y pruebe en su matriz de muestra específica para garantizar linealidad y sensibilidad.

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