Anticuerpo policlonal de conejo PIP5K1A para WB, IHC-P, ELISA - Q99755

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PIP5K1A

• PIP5K1A codifica la fosfatidilinositol 4-fosfato 5-quinasa alfa tipo I de 68 kDa (PIP5KIalpha), una quinasa lipídica fundamental para la señalización por fosfoinosítidos.
• Cataliza la conversión de fosfatidilinositol 4-fosfato (PI4P) en fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato (PIP2), un segundo mensajero lipídico esencial. Esta actividad constituye la vía predominante para la síntesis de PIP2.
  Referencias relacionadas: PMID:21477596, PMID:22942276, PMID:8955136
• El PIP2 actúa como precursor de los segundos mensajeros inositol 1,4,5-trisfosfato (IP3), diacilglicerol (DAG) y fosfatidilinositol-3,4,5-trisfosfato (PIP3), mediando así diversas cascadas de transducción de señales.
  Referencias relacionadas: PMID:19158393, PMID:20660631
• Gracias a la producción de PIP2, PIP5K1A regula la dinámica del citoesqueleto de actina, la adhesión celular, la motilidad, los repliegues de membrana y la formación de adhesiones focales. Es necesario para la fagocitosis, la adhesión plaquetaria, la diferenciación de queratinocitos y la translocación del transportador de glucosa inducida por insulina.
• En el núcleo, PIP5K1A activa la actividad adenililtransferasa de TUT1 en las gránulos nucleares, regulando así la poliadenilación de un conjunto selecto de ARNm.
  Referencias relacionadas: PMID:18288197
• Se localiza en la membrana celular, citoplasma, núcleo, gránulos nucleares y proyecciones celulares como repliegues y lamelipodios, lo que refleja sus múltiples funciones.
• Tiene una expresión alta en corazón, placenta, músculo esquelético, riñón y páncreas, con niveles más bajos en cerebro, pulmón e hígado.
• Está catalogado como fosfoproteína y proteína con enlaces isopéptidos y sitios de conjugación tipo ubiquitina; el empalme alternativo genera múltiples isoformas.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 231‑500 de PIP5K1A humana, una región que probablemente contiene epitopos conservados; se espera y confirma la reactividad cruzada con ratón por la homología de secuencia en este segmento. Se recomienda realizar una alineación de secuencias para confirmar la reactividad con otras especies.
• Para Western blotting, se espera una banda cerca de los 63 kDa. Utilice lisados de tejidos con alta expresión de PIP5K1A (por ejemplo, corazón, músculo esquelético) como control positivo, e incluya marcadores de peso molecular para verificar el tamaño de la banda.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), se pueden observar patrones de tinción en membrana, citoplasma y núcleo según el tipo celular y el contexto. Optimice la recuperación de antígenos e incluya controles negativos relevantes (por ejemplo, ausencia de anticuerpo primario o suero preinmune) para evaluar la especificidad.
• El ELISA se puede emplear para la titulación de anticuerpos o la detección de antígenos. Valide el ensayo utilizando proteína recombinante de PIP5K1A o lisados celulares, y determine las condiciones óptimas de recubrimiento y detección.
• Al ser un anticuerpo policlonal, puede detectar múltiples isoformas o productos de degradación; confirme la especificidad mediante experimentos de silenciamiento o sobreexpresión en su sistema modelo.

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