Anticuerpo monoclonal de conejo contra PIWIL4 para WB, IF/ICC, ELISA - Q7Z3Z4

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PIWIL4

• PIWIL4 (también denominada HIWI2 o MIWI2) es una proteína similar a Piwi y miembro de la familia Argonaute, fundamental para el silenciamiento génico mediado por piARN.
• Es esencial para la espermatogénesis al reprimir los elementos transponibles y mantener la integridad de la línea germinal a través de la vía de los piARN (Por similitud).
• Actúa en el núcleo para silenciar transposones activos al interactuar con los transcritos nacientes de elementos transponibles y dirigir la metilación del ADN y la represión (Por similitud).
• Carece de actividad endonucleasa, actuando como componente 'sin actividad de corte' en el bucle de amplificación de piARN (ping-pong), cargando los piARN cortados de PIWIL2 para dirigirse a los loci de transposones genómicos (Por similitud).
• Induce la metilación de 'Lys-9' de la histona H3 en algunos loci, contribuyendo al silenciamiento epigenético. Referencias relacionadas: PMID:17544373
• Se expresa de forma ubicua en tejidos humanos, y se detecta en retina, epitelio pigmentario retiniano y diversos tipos celulares. Referencias relacionadas: PMID:17544373 PMID:22483988 PMID:25038252 PMID:28025795 PMID:28711973
• En células somáticas, se localiza en el núcleo y el citoplasma; mantiene la integridad del epitelio retiniano a través de la señalización Akt/GSK3alfa/beta, y su sobreexpresión promueve la proliferación oncogénica. Referencias relacionadas: PMID:28025795 PMID:22483988

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 272-383 de la PIWIL4 humana, una región que probablemente está conservada entre humano, ratón y rata según la reactividad cruzada reportada; considere utilizar este anticuerpo para detectar PIWIL4 en estas especies.
• Para Western blot (WB), se espera una banda alrededor de 97 kDa; sin embargo, la migración real puede variar debido a modificaciones postraduccionales o variantes de isoforma. Incluya lisados de control positivo adecuados.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), se espera tinción tanto nuclear como citoplasmática, acorde con la distribución subcelular de PIWIL4; optimice las condiciones de fijación y permeabilización.
• Para ELISA, utilice proteína PIWIL4 recombinante (o el inmunógeno) como estándar para establecer los parámetros del ensayo; tenga en cuenta que el anticuerpo puede reconocer formas de proteína desnaturalizada y nativa, ya que fue generado contra una proteína de fusión recombinante.
• Valide la especificidad del anticuerpo en el sistema de muestra correspondiente (por ejemplo, usando controles de silenciamiento o knockout) para confirmar el reconocimiento del objetivo.

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