PLOD3 mAb de conejo - O60568

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PLOD3

• Identidad y función de la proteína: PLOD3, también conocido como LH3 (lisil hidroxilasa 3), es una enzima multifuncional que realiza modificaciones postraduccionales críticas en los residuos de lisina del colágeno.
• Actividad hidroxilasa: Cataliza la hidroxilación de lisina en los motivos -Xaa-Lys-Gly- de los procolágenos, generando hidroxilisina. Este paso es esencial para la estabilidad térmica del colágeno y la formación de enlaces cruzados. Referencias relacionadas: PMID:11956192, PMID:12475640, PMID:18298658
• Actividades glicosiltransferasa: Después de la hidroxilación, la enzima añade secuencialmente galactosa y glucosa a la hidroxilisina, formando 1,2-glucosilgalactosil-5-hidroxilisina. Estos eventos de glicosilación son indispensables para la secreción del colágeno de tipo IV, el ensamblaje de la membrana basal y también ocurren en el dominio similar al colágeno de MBL1. Referencias relacionadas: PMID:12475640, PMID:18298658, PMID:18834968, PMID:10934207, PMID:11896059, PMID:11956192, PMID:25419660
• Localización subcelular: PLOD3 reside predominantemente en el lumen y la membrana del retículo endoplásmico rugoso (RE), con una fracción menor secretada al espacio extracelular. Esto concuerda con su función en el procesamiento del colágeno dentro de la vía secretora.
• Distribución tisular: Se expresa de forma ubicua, con niveles más altos en corazón, placenta y páncreas, y niveles más bajos en pulmón, hígado y músculo esquelético. Referencias relacionadas: PMID:9582318, PMID:9724729
• Requisitos de cofactores: El dominio de hidroxilasa depende de Fe²⁺, 2-oxoglutarato, O₂ y ascorbato (vitamina C), mientras que las actividades glicosiltransferasa probablemente requieren Mn²⁺.
• Características estructurales: La enzima es en sí misma una glicoproteína con enlaces disulfuro intramoleculares.

Guía experimental y consejos técnicos

• Western blotting: En condiciones reductoras y desnaturalizantes, se debe observar una banda específica de aproximadamente 85 kDa. Utilice una carga de proteína adecuada y valide con un lisado de línea celular o tejido relevante que exprese PLOD3.
• Inmunohistoquímica (parafina): Se recomienda realizar una recuperación de antígeno estándar (por ejemplo, tampón de citrato, pH 6,0) y pasos de bloqueo. Se aconseja optimizar la concentración del anticuerpo primario y el sistema de detección.
• ELISA: El anticuerpo se puede utilizar en formatos de ELISA directo o de captura. Se debe realizar la titulación tanto del antígeno de recubrimiento como de la concentración del anticuerpo para determinar las condiciones óptimas.
• Consideraciones sobre el inmunógeno: Este anticuerpo se generó contra una proteína recombinante que abarca los aminoácidos 25–306 (región N-terminal). Puede detectar tanto PLOD3 de longitud completa como posibles fragmentos N-terminales.

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