Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD8a para citometría de flujo - P01732

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la CD8a

• CD8a (cadena alfa de la glicoproteína CD8 de superficie de linfocitos T) es una proteína transmembrana también conocida como antígeno de diferenciación de linfocitos T T8/Leu-2. Está codificada por el gen CD8A (ID de gen: 925) y desempeña un papel fundamental en la inmunidad adaptativa.
• En las células T, la CD8a funciona como coreceptor para las moléculas de MHC de clase I. Se une simultáneamente al receptor de célula T (TCR) y al MHC de clase I en las células presentadoras de antígeno, lo que provoca el reclutamiento de la tirosina quinasa LCK. Esto inicia cascadas de señalización intracelular que promueven la activación de los linfocitos T citotóxicos (CTL), la producción de citocinas y la eliminación de células diana.
• La CD8 puede existir como heterodímero unido por disulfuro con CD8b (alfa/beta) o como homodímero de CD8a. La forma homodimérica se encuentra en subconjuntos de células asesinas naturales (NK), células T de memoria, linfocitos intraepiteliales, monocitos y células dendríticas.
• En las células NK, los homodímeros de CD8a facilitan la conjugación y lisis de células diana, y promueven la supervivencia y diferenciación de los linfocitos activados en células T CD8 de memoria.
• A nivel subcelular, la CD8a se localiza en la membrana celular y también es secretada. Contiene péptido señal, dominio transmembrana y dominios similares a inmunoglobulinas.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación, palmitoilación y formación de enlaces disulfuro intramoleculares, que son esenciales para su estabilidad y función.
• Expresión tisular: en células T derivadas del timo generalmente como heterodímero alfa/beta; en células dendríticas plasmacitoides después de la estimulación por el virus del herpes simple tipo 1; y en varios subconjuntos de células inmunitarias como homodímeros.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo está conjugado directamente con , lo que elimina la necesidad de un anticuerpo secundario en los protocolos de citometría de flujo. Incluya controles de isotipo adecuados y discriminación de células vivas/muertas en su panel.
• Prepare suspensiones de células individuales a partir de muestras frescas o crioconservadas correctamente de humano o macaco cangrejero. Se recomienda el bloqueo de receptores Fc para reducir la unión no específica.
• El inmunógeno corresponde al dominio extracelular (aminoácidos 22–182), lo que garantiza el reconocimiento de la forma nativa unida a la membrana. Valide la especificidad utilizando poblaciones celulares positivas (por ejemplo, PBMC humanas) y negativas conocidas.
• Los múltiples pesos proteicos reportados (21, 25, 30 kDa) probablemente reflejan glicosilación diferencial o isoformas. Confirme el patrón de banda esperado en su tipo de célula diana cuando utilice técnicas complementarias como la transferencia Western.
• Aunque está diseñado principalmente para citometría de flujo, la idoneidad para aplicaciones cruzadas (por ejemplo, ICC, IHC) puede ser factible; se recomienda realizar pruebas piloto en sus condiciones específicas.

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