Anticuerpo monoclonal ABflo 488 de conejo anti-C5AR1/CD88 humano para citometría de flujo - P21730

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de C5AR1/CD88

• C5AR1/CD88 es un miembro de la familia de receptores acoplados a proteínas G (GPCR) y funciona como receptor de la anafilatoxina C5a, un potente péptido quimiotáctico e inflamatorio. Referencias relacionadas: PMID:10636859 PMID:15153520 PMID:1847994
• Tras la unión a C5a, el receptor estimula la quimiotaxis, la liberación de enzimas de gránulos, la movilización de calcio intracelular y la producción de anión superóxido, impulsando las respuestas inmunitarias innatas. Referencias relacionadas: PMID:10636859 PMID:15153520 PMID:1847994
• La interacción ligando-receptor involucra dos sitios distintos: un sitio de alta afinidad en el extremo N-terminal extracelular y un segundo sitio dentro de la región transmembrana que desencadena eventos de señalización posteriores. Referencias relacionadas: PMID:7622471 PMID:8182049 PMID:9553099
• La señalización se media principalmente a través del acoplamiento a proteínas G(i)/G(o) (GNAI1 o GNAO1), lo que lleva a la inhibición de la adenilato ciclasa y la modulación de los niveles intracelulares de cAMP. Referencias relacionadas: PMID:36806352 PMID:37852260
• Subcelularmente, C5AR1 se localiza predominantemente en la membrana celular, pero también se puede encontrar en vesículas citoplasmáticas después de la internalización inducida por agonistas.
• Las modificaciones postraduccionales, que incluyen glicosilación, fosforilación, sulfatación y formación de enlaces disulfuro, son cruciales para el plegamiento correcto del receptor, la unión al ligando y la transducción de señales.

Guía experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo es un monoclonal de conejo conjugado con ABflo 488, que permite la detección directa por fluorescencia en citometría de flujo sin necesidad de un anticuerpo secundario. Optimice los protocolos de tinción para muestras humanas de células vivas o fijadas que expresen C5AR1.
• Dado que el inmunógeno es un péptido sintético de la región N-terminal (aa 1–100), considere usar el mismo péptido como control de bloqueo para confirmar la especificidad de la tinción en su configuración experimental.
• La reactividad humana está confirmada; si se requiere reactividad cruzada con otras especies, valídelo de forma independiente utilizando líneas celulares o células primarias adecuadas.
• Como GPCR, C5AR1 puede sufrir internalización rápida después de la estimulación por ligando; para detectar la expresión superficial, realice la tinción a 4 °C o en presencia de azida de sodio para inhibir la recambio del receptor.
• Aunque está validado únicamente para citometría de flujo, el anticuerpo puede ser adecuado para otras aplicaciones (por ejemplo, inmunofluorescencia, inmunoprecipitación) con la optimización experimental y los controles adecuados.

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