Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Calreticulina humana para FC (intra) - P27797

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la calreticulina

• La calreticulina es una chaperona de unión al calcio altamente conservada, también conocida como CRP55, Calregulina, ERp60, HACBP o grp60. Es el producto del gen CALR en humanos (ID de gen: 811).
• En el retículo endoplasmático, la calreticulina actúa como una chaperona de tipo lectina que promueve el plegamiento, el ensamblaje oligomérico y el control de calidad de las glicoproteínas nacientes a través del ciclo de calreticulina/calnexina. Interactúa transitoriamente con casi todas las glicoproteínas monoglucosiladas sintetizadas en el RE. Referencias relacionadas: PMID:7876246
• Más allá del RE, la calreticulina interactúa con el dominio de unión al ADN del receptor nuclear NR3C1 y media su exportación nuclear, vinculando la proteína con la regulación transcripcional. Referencias relacionadas: PMID:11149926
• La calreticulina está implicada en la biología reproductiva, donde participa en la regulación de la expresión génica materna y puede contribuir a la maduración del ovocito a través de la homeostasis del calcio. En ovocitos no activados, está presente en los gránulos corticales y se exocita durante la reacción cortical para ayudar a prevenir la poliespermia.
• A nivel subcelular, la calreticulina se encuentra predominantemente en la luz del retículo endoplasmático, pero también puede localizarse en el citosol, el espacio extracelular, la superficie celular, el retículo sarcoplásmico y vesículas secretoras como los gránulos corticales y citolíticos.
• La proteína sufre diversas modificaciones postraduccionales, incluyendo acetilación, hidroxilación y formación de puentes disulfuro. Presenta un péptido señal, motivos repetitivos y se clasifica bajo múltiples palabras clave: chaperona, calcio, unión a metales (zinc), glicoproteína, lectina y otros.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 335–417 de la calreticulina humana, una región C‑terminal distinta del péptido señal N‑terminal y los dominios de chaperona. Este diseño puede permitir la detección de la calreticulina total independientemente del estado de retención en el RE o de secreción.
• Dado que la calreticulina reside principalmente en la luz del RE, la citometría de flujo intracelular (FC intra) requiere la fijación y permeabilización de las células. Optimice las condiciones de permeabilización (por ejemplo, usando saponina o metanol) para garantizar el acceso del anticuerpo preservando la reactividad del epítopo.
• es un fluoróforo rojo lejano que permite la multiplexación con otros marcadores intracelulares minimizando la superposición espectral. Titule el anticuerpo para determinar la relación señal‑ruido óptima para su sistema experimental específico.
• Considere el uso de este anticuerpo para investigar el estrés del RE, la dinámica del control de calidad de proteínas o eventos de translocación de calreticulina en modelos celulares humanos. Como con cualquier tinción intracelular, incluya los controles apropiados (células no estimuladas, controles de isotipo y menos uno de fluorescencia) para validar la especificidad.

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