Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD141/Trrombomodulina humana para citometría de flujo - P07204

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la trombomodulina

• La trombomodulina (CD141/BDCA-3, también conocida como fetomodulina) es un receptor transmembrana expresado abundantemente en las células endoteliales vasculares, que participa en la hemostasia, la coagulación, la fibrinólisis, la inflamación y la angiogénesis. Referencias relacionadas: PMID:10761923
• Actúa como cofactor para la activación de la proteína C mediada por la trombina en la superficie endotelial, iniciando la vía anticoagulante. Referencias relacionadas: PMID:29323190, PMID:33836597, PMID:9395524
• La trombomodulina acelera la activación de la carboxipeptidasa B2 plasmática (CPB2), que escinde los aminoácidos básicos C-terminales de las cininas y las anafilatoxinas, contribuyendo a la inhibición de la fibrinólisis. Referencias relacionadas: PMID:26663133
• Suprime la inflamación mediante el secuestro de la molécula proinflamatoria HMGB1, impidiendo su interacción con RAGE y otros receptores. Referencias relacionadas: PMID:15841214
• La proteína altera la especificidad de escisión del receptor 1 activado por proteasas (PAR1), inhibiendo así la permeabilidad endotelial y la inflamación (por similitud).
• Localización subcelular: predominantemente unida a la membrana.
• Especificidad tisular: la expresión es exclusiva de las células endoteliales.
• Las características estructurales incluyen un dominio similar al EGF, enlaces disulfuro, glicosilación y una modificación de proteoglucano; la proteína madura migra aproximadamente a 60 kDa.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Este conjugado está destinado a la tinción por inmunofluorescencia directa y a la detección mediante citometría de flujo de CD141/Trrombomodulina humana en la superficie de células vivas o fijadas.
• La concentración óptima del anticuerpo debe determinarse mediante titulación en el sistema experimental correspondiente; para la tinción de la superficie celular suele utilizarse un intervalo inicial de 0,5–5 µg/mL.
• Utilice un control de isotipo adecuado y un colorante de viabilidad para discriminar las células vivas y minimizar el fondo.
• Para la preparación de muestras, evite la sobredigestión con tripsina, ya que la trombomodulina es sensible a la tripsina; considere el uso de reactivos de disociación no enzimáticos.
• CD141 se expresa considerablemente en las células endoteliales vasculares; considere el uso de cultivos primarios de células endoteliales o células progenitoras endoteliales de sangre periférica como control positivo.
• Tenga en cuenta que el anticuerpo reconoce un epítopo extracelular; no se requiere permeabilización para la tinción de superficie, aunque puede emplearse para detectar reservas intracelulares si es necesario después de la fijación.

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