Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD166/ALCAM humano para citometría de flujo - Q13740

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD166/ALCAM

• CD166/ALCAM, también conocida como molécula de adhesión de leucocitos activados, es una molécula de adhesión celular que media contactos célula-célula tanto heterotípicos (con CD6) como homotípicos, desempeñando un papel clave en la activación de linfocitos T y la formación de la sinapsis inmunológica. Referencias relacionadas: PMID:15048703, PMID:15496415, PMID:16352806, PMID:24945728, PMID:15294938
• Actúa como ligando del receptor inhibidor LILRB4, suprimiendo la proliferación de linfocitos T, y es esencial para el injerto de células madre hematopoyéticas en la médula ósea. Referencias relacionadas: PMID:29263213, PMID:24740813
• Las interacciones homotípicas de ALCAM facilitan la unión de las células dendríticas a las células endoteliales, inhiben la migración de las células endoteliales y promueven la formación de tubos. Referencias relacionadas: PMID:23169771, PMID:15496415
• Una isoforma secretada por empalme alternativo antagoniza las funciones de ALCAM unida a la membrana, inhibiendo la adhesión celular y promoviendo la migración de células endoteliales.
• A nivel subcelular, ALCAM se localiza en la membrana celular, incluyendo las proyecciones de axones y dendritas, y puede ser secretada.
• Su expresión tisular es amplia: se detecta en células madre hematopoyéticas, linfocitos T/B activados, monocitos, células dendríticas y diversas células endoteliales y epiteliales; se encuentra elevada en líneas de melanoma metastásico. Referencias relacionadas: PMID:24740813, PMID:23169771, PMID:15048703, PMID:16352806, PMID:9502422, PMID:7760007, PMID:15496415
• La proteína contiene dominios de tipo inmunoglobulina, está glicosilada y presenta enlaces disulfuro; la isoforma canónica tiene un peso molecular predicho de ~65 kDa, pero pueden observarse múltiples bandas debido al empalme alternativo y la glicosilación.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca el dominio extracelular (aa 28–526), que incluye la región de unión al ligando; esto sugiere que el anticuerpo probablemente reconoce un epitopo accesible en células vivas, por lo que es adecuado para citometría de flujo.
• Para citometría de flujo, titule el anticuerpo para determinar la concentración de tinción óptima para su tipo celular; incluya controles de isotipo apropiados.
• Dado que la expresión de ALCAM varía entre tipos celulares y estados de activación, valide la tinción con controles positivos conocidos (por ejemplo, linfocitos T activados, células dendríticas) y controles negativos.
• Múltiples bandas de proteína (15–65 kDa) anotadas en las especificaciones pueden reflejar variantes de empalme o productos de escisión; si realiza transferencia Western, confirme la especificidad con un lisado de células que sobreexpresan ALCAM.
• Este anticuerpo está validado para reactividad humana; no se informa reactividad cruzada con otras especies, por lo que debe probarse si es necesario.

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