Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD228/MFI2 humano para citometría de flujo - P08582

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD228/MFI2

• Codificada por el gen MELTF (también conocido como MAP97, MFI2), la melanotransferrina es una glicoproteína de superficie celular perteneciente a la familia de las transferrinas. El empalme alternativo genera isoformas: la proteína de longitud completa tiene ~80 kDa y una isoforma secretada tiene ~32 kDa.
• Interviene en la captación celular de hierro: se une a un ion férrico por subunidad, se internaliza y recicla de vuelta a la membrana plasmática; también puede transportar zinc.
• Identificada originalmente como el antígeno p97 asociado al melanoma, se expresa predominantemente en melanomas humanos, ciertos tejidos fetales, hígado, epitelio, cordón umbilical, placenta y conductos de las glándulas sudoríparas.
• Está anclada a la membrana celular mediante un resto GPI en el extremo C-terminal, actuando como transportador anclado a lípidos en lugar de un portador soluble.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen enlaces disulfuro, glicosilación y fosforilación, según lo identificado por proteómica.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno cubre los aminoácidos 20-708, que comprenden casi todo el dominio extracelular de longitud completa; verifique la reactividad con CD228 nativo y recombinante en su panel de citometría de flujo.
• Al ser un anticuerpo conjugado directamente, no se necesita reactivo secundario; realice la titulación desde 0,1–1 µg por millón de células para determinar el índice de tinción óptimo.
• Valide la especificidad usando células con silenciamiento de CD228 o una línea celular negativa conocida; controle la viabilidad y realice la exclusión de dobletes para evitar artefactos causados por células moribundas con alta autofluorescencia.
• Las proteínas ancladas por GPI pueden ser sensibles a la tripsina; prepare suspensiones de células individuales con disociación enzimática o mecánica suave si trabaja con líneas celulares adherentes.

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