Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD261/TRAIL-R1 humano para citometría de flujo - O00220

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD261/TRAIL-R1

• TNFRSF10A, también conocido como Receptor de muerte 4 (DR4) o TRAIL-R1, es un miembro de la superfamilia de receptores del factor de necrosis tumoral. Actúa como receptor del ligando citotóxico TNFSF10/TRAIL. Referencias relacionadas: PMID:26457518, PMID:38532423
• Tras la unión a TRAIL, el receptor recluta la molécula adaptadora FADD y la caspasa-8 para formar el complejo de señalización inductora de muerte (DISC), que activa proteolíticamente la caspasa-8 e inicia la cascada de caspasas apoptóticas. Referencias relacionadas: PMID:19090789
• TRAIL-R1 también promueve la activación de NF-kappa-B, lo que lo vincula a vías de señalización inflamatorias y de supervivencia celular. Referencias relacionadas: PMID:9430227
• La proteína se localiza principalmente en la membrana celular y las balsas de membrana, aunque también se ha detectado en el citoplasma y el citosol.
• Se expresa de forma amplia, con niveles altos en bazo, leucocitos de sangre periférica, intestino delgado y timo, así como en ciertas líneas celulares cancerosas como K-562 y MCF-7.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la formación de enlaces disulfuro, glicosilación, metilación y fosforilación, que pueden regular su función y estabilidad.
• Como proteína transmembrana de tipo I, contiene un péptido señal, repeticiones extracelulares ricas en cisteína, una hélice transmembrana y un dominio de muerte citoplasmático.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde al dominio extracelular (aminoácidos 124–232), lo que indica que el anticuerpo reconoce un epítopo accesible en la superficie celular, lo que es óptimo para la detección por citometría de flujo de células vivas no permeabilizadas.
• Como conjugado fluorescente, se recomienda realizar una titulación cuidadosa para lograr la relación señal-ruido óptima; las concentraciones iniciales típicas para citometría de flujo pueden estar en el rango de 0,1–1 µg por muestra, pero esto debe validarse experimentalmente.
• Asegúrese de utilizar controles adecuados, incluyendo controles de isotipo y células sin tinción, para establecer las compuertas y evaluar la tinción de fondo específica para sus líneas celulares y condiciones de tratamiento.
• Para un análisis completo de la apoptosis inducida por TRAIL, considere la co-tinción con marcadores de apoptosis (por ejemplo, Anexina V, caspasa-3 clivada) u otros receptores de muerte (por ejemplo, TRAIL-R2/DR5).

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