Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD28 humano para citometría de flujo - P10747

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de CD28

• CD28 es una glicoproteína de superficie específica de linfocitos T que actúa como receptor coestimulador esencial para la activación, proliferación, supervivencia de linfocitos T y el mantenimiento de la homeostasis inmune. Referencias relacionadas: PMID:1650475 PMID:7568038
• Al interactuar con sus ligandos específicos CD80 o CD86, CD28 amplifica las señales del receptor de linfocitos T (TCR) y entrega señales intracelulares únicas que reprograman la expresión génica de las células T, lo que conduce a una mayor proliferación y producción de citocinas, especialmente IL-2, tanto en subpoblaciones de linfocitos T CD4+ como CD8+. Referencias relacionadas: PMID:12196291 PMID:24665965 PMID:35397202
• La unión del ligando desencadena el reclutamiento de la proteína quinasa C-theta (PRKCQ) y GRB2, activando NF-kappa-B a través de vías dependientes e independientes de PI3K/Akt; en conjunto con la coestimulación de TCR/CD3 y CD40L, esto aumenta la producción de IL-4 e IL-10. Referencias relacionadas: PMID:21964608 PMID:24665965 PMID:7568038 PMID:8617933
• CD28 también potencia la activación mediada por CD40L de NF-kappa-B y las quinasas MAPK8 y PAK2 en linfocitos T. Referencias relacionadas: PMID:15067037
• Expresado en la superficie celular de linfocitos T y células plasmáticas, CD28 pertenece a la superfamilia de las inmunoglobulinas y contiene un único dominio de tipo V similar a inmunoglobulina, una región transmembrana y una cola citoplasmática que se fosforila después de la activación.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación ligada a N y fosforilación en residuos de tirosina, que son críticas para la transducción de señales.
• La proteína madura tiene un peso molecular calculado de aproximadamente 25 kDa (25066 Da), lo que coincide con su detección en aplicaciones de Western blot y citometría de flujo.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se generó contra la proteína recombinante de longitud completa de CD28 humano (P10747). Su rendimiento ha sido validado para citometría de flujo (FC); para otras aplicaciones, los usuarios deben realizar una optimización individual.
• Para FC, realice una titulación del anticuerpo para determinar la concentración óptima de tinción en el sistema de muestra correspondiente, e incluya controles de isotipo adecuados y pasos de bloqueo de Fc para minimizar la unión no específica.
• Dado que CD28 se internaliza rápidamente después de la activación, considere realizar la tinción de superficie a 4 °C o usar un inhibidor metabólico para evitar la internalización inducida por ligando si estudia linfocitos T activados.
• Confirme la especificidad por el objetivo preincubando el anticuerpo con un exceso de proteína recombinante de CD28 para bloquear la tinción específica.

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