Anticuerpo monoclonal conejo anti-humano CD301/CLEC10A para FC - Q8IUN9

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CLEC10A

• CLEC10A es un receptor de lectina tipo C de tipo II transmembrana con isoformas de empalme alternativo, también conocido como CD301, lectina tipo galactosa de macrófagos (MGL), HML y receptor de asialoglicoproteína de DC, expresado predominantemente en células presentadoras de antígeno mieloides.
• Se une específicamente a residuos terminales de N-acetilgalactosamina (GalNAc) presentes en glicoproteínas y glicolípidos, incluido el antígeno Tn, LacdiNAc y gangliósidos GM2/GD2, de una manera dependiente de Ca2+. Referencias relacionadas: PMID:15802303, PMID:23507963
• En células dendríticas inmaduras, CLEC10A interactúa con el CD45 modificado con antígeno Tn en células T, regulando negativamente su actividad fosfatasa para modular la activación, proliferación y producción de citocinas de las células T, promoviendo la maduración tolerogénica de células dendríticas y la inducción de células T reguladoras. Referencias relacionadas: PMID:15802303, PMID:16998493, PMID:22213806
• Como receptor endocítico, CLEC10A internaliza antígenos tumorales que portan el antígeno Tn para su presentación en el MHC de clase I y II, vinculando el reconocimiento innato con las respuestas inmunitarias antitumorales adaptativas. Referencias relacionadas: PMID:15802303, PMID:17616966, PMID:17804752
• Subcelularmente, CLEC10A se localiza en la membrana plasmática y, tras la unión del ligando, se transporta a las membranas del endosoma temprano y del lisosoma para el procesamiento de antígenos.
• A nivel de proteína, CLEC10A se expresa en células presentadoras de antígeno mieloides en ganglios linfáticos y piel, específicamente en células dendríticas dérmicas.
• La proteína contiene un dominio de hélice superenrollada, un dominio de lectina tipo C, una hélice transmembrana y posibles sitios de N-glicosilación; su actividad está regulada por Ca2+ y la formación de enlaces disulfuro.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde al dominio extracelular (aa 61-316) que incluye el dominio de reconocimiento de carbohidratos (CRD), lo que indica que el anticuerpo probablemente se dirige a la región de unión al ligando; considere verificar la integridad del epítopo estructural en condiciones nativas versus desnaturalizantes.
• Para citometría de flujo, este conjugado fluorescente se puede utilizar para detectar CLEC10A en la superficie celular de células mieloides humanas; valore la dilución óptima del anticuerpo e incluya controles de isotipo apropiados para garantizar la especificidad.
• Se ha reportado reactividad cruzada con CLEC10A humano; valide la reactividad en su sistema de muestra específico, especialmente considerando posibles variaciones de isoforma.
• Utilice tampón helado y evite la permeabilización a menos que se dirija a compartimentos intracelulares, ya que el receptor está unido a la membrana; incluya pasos de bloqueo del receptor Fc para el análisis de células mieloides.
• Considere la tinción conjunta con marcadores de células dendríticas (por ejemplo, CD11c, CD1c) para confirmar la expresión en subconjuntos de células dendríticas; tenga en cuenta que el estado de activación puede alterar los niveles de expresión de CLEC10A.

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