Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD307b humano para citometría de flujo - Q96LA5

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD307b (FCRL2)

• CD307b, también conocido como proteína 2 similar al receptor Fc (FCRL2), FcRH2 o IRTA4, es un receptor transmembrana que pertenece a la superfamilia de las inmunoglobulinas. Contiene múltiples dominios similares a inmunoglobulinas y forma parte de la familia de proteínas similares a los receptores Fc.
• La proteína puede desempeñar un papel regulador en el desarrollo de linfocitos B normales y neoplásicos, según lo sugieren su patrón de expresión y características estructurales.
• En humanos, FCRL2 está codificado por el gen FCRL2 y se localiza en el cromosoma 1q23.2. Sufre splicing alternativo que genera múltiples isoformas con distribuciones tisulares distintas.
• A nivel subcelular, CD307b está anclado en la membrana celular mediante una única hélice transmembrana, con un dominio extracelular que contiene sitios potenciales de glicosilación y enlaces disulfuro que estabilizan sus pliegues de inmunoglobulina.
• Su expresión tisular está restringida a líneas de linfocitos B maduros, particularmente en órganos linfoides secundarios como el bazo y los ganglios linfáticos. Se expresa altamente en linfocitos B CD19+ y dentro de las zonas del manto del tejido amigdalino. A nivel proteico, se detecta de forma preferente en linfocitos B de memoria.
• La isoforma 2 se expresa en el bazo, sangre periférica y médula ósea, mientras que las isoformas 2 y 4 están presentes en líneas de linfocitos B, lo que indica una regulación compleja de la expresión.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la glicosilación al tratarse de una glicoproteína, y la proteína contiene enlaces disulfuro conservados importantes para su arquitectura de dominios. Estas características son típicas de los receptores de superficie celular implicados en la señalización inmune.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado para generar este anticuerpo es una proteína de fusión recombinante que abarca los aminoácidos 20–395 de CD307b humano, lo que corresponde a todo el dominio extracelular (ECD, por sus siglas en inglés). Este diseño probablemente produce anticuerpos que reconocen la conformación nativa del receptor de superficie celular.
• Dado que este anticuerpo está conjugado con , está listo para usarse directamente en citometría de flujo (FC) sin necesidad de tinción secundaria. Se recomienda titular el anticuerpo para determinar la concentración de trabajo óptima para sus muestras específicas de linfocitos B.
• Dada la expresión restringida de CD307b en linfocitos B maduros y de memoria, incluya controles positivos adecuados (por ejemplo, células mononucleares de sangre periférica humana o linfocitos B derivados de amígdala) y controles de isotipo para garantizar la especificidad.
• Como el anticuerpo solo está validado para reactividad en humanos, no se espera reactividad cruzada con otras especies. Si se utiliza en un sistema no humano, se recomienda realizar una prueba previa si se sospecha reactividad cruzada.
• Para la tinción en FC, asegúrese de que las células sean viables y que los receptores Fc estén bloqueados para minimizar la unión no específica, especialmente cuando se trabaja con poblaciones de linfocitos B que expresan otros receptores Fc.

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