Anticuerpo monoclonal conejo anti-humano CD326/EPCAM para IF/ICC y FC - P16422

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la molécula de adhesión celular epitelial (EpCAM)

• EpCAM es una glicoproteína transmembrana de tipo I que funciona como una molécula de adhesión celular homofílica, mediando interacciones físicas entre las células epiteliales intestinales (IECs) y los linfocitos intraepiteliales (IELs) para mantener la barrera inmunológica mucosa.
• Desempeña un papel crítico en la proliferación y diferenciación de células madre embrionarias, y sus niveles de expresión disminuyen rápidamente tras la diferenciación.
• EpCAM regula al alza la expresión de FABP5, MYC y las ciclinas A y E, vinculándola con la regulación del ciclo celular y el control del crecimiento.
• La proteína se localiza en la membrana celular lateral y en las uniones estrechas, lo que es consistente con su función en la adhesión célula-célula y la integridad epitelial.
• Especificidad tisular: Se expresa de forma alta y selectiva en células madre embrionarias no diferenciadas y en casi todas las membranas de células epiteliales, pero está ausente en las membranas de células mesodérmicas o neurales; se encuentra frecuentemente en la superficie de adenocarcinomas.
• Es un antígeno tumoral bien caracterizado y está asociado al cáncer colorrectal hereditario no polipósico.
• La proteína procesada contiene un péptido señal, una hélice transmembrana, enlaces disulfuro y sitios de N-glicosilación, con una masa molecular calculada de aproximadamente 34.9 kDa.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno comprende el dominio extracelular (aminoácidos 24-265), lo que se espera que genere anticuerpos dirigidos a epítopos accesibles en la superficie celular, adecuados para tinción de células vivas o condiciones no permeabilizadas.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), considere optimizar los protocolos de fijación y permeabilización basándose en la localización del objetivo en las membranas laterales y las uniones estrechas; valide en líneas celulares epiteliales humanas.
• En citometría de flujo (FC), utilice el formato conjugado directamente con ; valore el anticuerpo para lograr una relación señal/ruido óptima e incluya controles de isotipo apropiados.
• Debido a que solo tiene reactividad cruzada humana, verifique la expresión del objetivo en su modelo de célula o tejido antes de su uso.
• El peso proteico es de aproximadamente 35 kDa; confírmelo con marcadores de peso molecular y condiciones de bloqueo en los ensayos posteriores.

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