Anticuerpo monoclonal conejo anti-humano CD335/NKp46 para IF/ICC y FC - O76036

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización del receptor 1 desencadenante de citotoxicidad natural (CD335/NKp46)

• La proteína es un receptor desencadenante de citotoxicidad natural (NCR1), también conocido como CD335, LY94 o NKp46. Pertenece a la superfamilia de las inmunoglobulinas y existe en múltiples isoformas debido al empalme alternativo.
• Funciona como un receptor activador de citotoxicidad que mejora la capacidad de las células asesinas naturales (NK) activadas para lisar células tumorales.
• CD335/NKp46 se expresa selectivamente tanto en células NK en reposo como activadas, sirviendo como un marcador específico para la identificación de células NK.
• El receptor es una glicoproteína transmembrana de tipo I ubicada en la membrana celular, con una región extracelular que contiene dos dominios tipo inmunoglobulina.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación N-ligada y formación de enlaces disulfuro, lo que contribuye a su estabilidad estructural.
• El gen NCR1 se localiza en el cromosoma 19 humano y codifica una proteína con un peso molecular predicho de aproximadamente 34.5 kDa, aunque las bandas observadas pueden variar debido a la glicosilación (rango de 21-34 kDa).

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno comprende el dominio extracelular (aa 22-254) del CD335/NKp46 humano, que está expuesto en la superficie celular; este diseño es adecuado para detectar el receptor nativo.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), considere usar preparaciones celulares fijadas con acetona o paraformaldehído, e incluya un control negativo sin el anticuerpo primario para evaluar el fondo.
• Para citometría de flujo (FC), la conjugación directa con elimina la necesidad de un anticuerpo secundario; asegúrese de que el fluoróforo sea compatible con las configuraciones de láser y filtro de su instrumento (excitación/emisión similar a Alexa Fluor 594).
• Se deben usar células expresoras o líneas celulares NK como controles positivos; los PBMC humanos recién aislados pueden servir como fuente de células NK endógenas que expresan CD335/NKp46.
• Debido a la heterogeneidad de la glicosilación, pueden aparecer múltiples bandas en el western blot; si se intenta WB, tenga en cuenta que el epítopo puede desnaturalizarse en condiciones reductoras y de ebullición.

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