Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD34 humano para FC - P28906

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD34

• CD34, también conocido como antígeno de células progenitoras hematopoyéticas CD34, es una proteína de membrana de tipo I de paso único que pertenece a la familia de CD34. Sufre splicing alternativo, dando lugar a isoformas con pesos moleculares aparentes de aproximadamente 35 kDa y 41 kDa.
• Funciona como molécula de adhesión celular, desempeñando un papel fundamental en la hematopoyesis temprana al mediar la unión de las células madre/progenitoras hematopoyéticas a la matriz extracelular de la médula ósea y a las células del estroma.
• CD34 puede actuar como un andamio que presenta glicanos específicos de linaje, permitiendo que las células madre se unan a las lectinas expresadas por las células del estroma u otros componentes de la médula, regulando así la localización y retención celular.
• Presenta ligandos de hidratos de carbono a las selectinas, lo que favorece aún más la adhesión y el tráfico celular dentro del nicho hematopoyético.
• La proteína se expresa selectivamente en la superficie de las células progenitoras hematopoyéticas y en el endotelio de pequeños vasos de diversos tejidos, lo que lo convierte en un marcador clave para el aislamiento de células madre y los estudios de biología vascular.
• La localización subcelular se produce principalmente en la membrana plasmática, lo que coincide con su función en las interacciones célula-célula y célula-matriz.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen una extensa glicosilación ligada a N y O, fosforilación, y la presencia de un péptido señal y un dominio transmembrana.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo está diseñado para citometría de flujo (FC) y está conjugado directamente con , un fluoróforo excitable por láser violeta; no se requiere un reactivo de detección secundario, lo que reduce los pasos experimentales y el fondo de señal.
• El inmunógeno abarca los aminoácidos 170-290 de CD34 humano (dentro de la región extracelular), lo que indica que el anticuerpo reconoce un epitopo extracelular en células vivas; se recomienda manipular las células con cuidado para preservar la integridad del antígeno de superficie.
• Para aplicaciones de FC, realice una titulación del anticuerpo para determinar la concentración óptima para su tipo de celular y condiciones de tinción, e incluya controles de isotipo apropiados y controles de fluorescencia menos uno (FMO).
• Valide el rendimiento con células humanas positivas para CD34 conocidas (por ejemplo, líneas celulares KG-1a o MOLM-13) o células progenitoras hematopoyéticas primarias, y considere la realización de una cotinción con otros marcadores de células madre para evaluar las subpoblaciones de progenitores.
• Los pesos moleculares predichos de 35 kDa y 41 kDa pueden corresponder a isoformas con diferente glicosilación; esta información se puede utilizar para confirmar la especificidad en transferencia Western si el anticuerpo está validado para esa aplicación, pero la recomendación principal sigue siendo FC.

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