Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD34 humano para IF/ICC y citometría de flujo - P28906

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización del CD34

• El antígeno CD34 de células progenitoras hematopoyéticas, codificado por el gen CD34, es un marcador bien establecido de células madre y progenitoras hematopoyéticas y también marca el endotelio de pequeños vasos.
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas; la isoforma canónica tiene un peso molecular calculado de aproximadamente 41 kDa (UniProt: 40716 Da), mientras que una variante más corta de 35 kDa puede surgir del procesamiento postraduccional o diferencias de isoformas.
• El CD34 es una glucoproteína transmembrana de paso único tipo I que probablemente funciona como molécula de adhesión, mediando la unión de células madre a la matriz extracelular de la médula ósea o a las células estromales durante la hematopoyesis temprana.
• Puede servir como andamio para glúcidos específicos de linaje, presentando ligandos de carbohidratos a selectinas y facilitando las interacciones célula-célula.
• La localización subcelular se encuentra principalmente en la membrana celular, lo que es consistente con su función en adhesión extracelular y señalización.
• La proteína está sujeta a extensas modificaciones postraduccionales, incluyendo glicosilación N y O (glucoproteína) y fosforilación, lo que puede regular su función y propiedades de unión.
• La expresión es altamente selectiva: el CD34 se encuentra en células progenitoras hematopoyéticas en la médula ósea y la sangre periférica, así como en el endotelio de pequeños vasos en muchos tejidos.
• La región extracelular (incluyendo los aminoácidos 170-290 utilizados como inmunógeno) contiene múltiples sitios de glicosilación y está expuesta en la superficie celular, lo que la convierte en un objetivo accesible para la detección basada en anticuerpos.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región extracelular (aa 170-290) del CD34 humano, asegurando el reconocimiento del antígeno de superficie nativo; este anticuerpo está validado para aplicaciones de IF/ICC y citometría de flujo.
• Para la tinción de inmunofluorescencia, fije y permeabilice las células adecuadamente; considere usar un protocolo sin permeabilización para detectar el CD34 de superficie si se desea.
• En citometría de flujo, incluya controles de isotipo apropiados y pasos de bloqueo de receptores Fc para minimizar la unión inespecífica; titre el anticuerpo para determinar la concentración óptima para su sistema celular.
• La expresión de CD34 se limita a tipos celulares específicos; use controles positivos bien caracterizados (p. ej., células KG-1a, HUVECs o progenitores hematopoyéticos CD34+) y controles negativos (p. ej., linfocitos, células sanguíneas maduras) para confirmar la especificidad.
• Si bien este conjugado está diseñado para IF/ICC y FC, si explora otras aplicaciones (p. ej., IHC, WB), valide el anticuerpo bajo esas condiciones y considere las posibles diferencias en la conformación del antígeno.

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