Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD370/CLEC9A humano para citometría de flujo - Q6UXN8

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD370/CLEC9A

• Identidad y alias de la proteína: CD370, también conocido como miembro A de la familia 9 del dominio de lectina tipo C (CLEC9A), DNGR-1 y UNQ9341, está codificado por el gen CLEC9A en humanos.
• Función principal como receptor endocítico: CLEC9A funciona como un receptor endocítico en un pequeño subconjunto de células mieloides, especializado en la captación y procesamiento de material de células muertas. Media la presentación cruzada de antígenos asociados a células muertas de una manera dependiente de Syk.
• Mecanismo de reconocimiento de ligando: El receptor reconoce la forma filamentosa de actina (F-actina) en asociación con dominios particulares de unión a actina de proteínas del citoesqueleto, incluida la espectrina, que quedan expuestos tras el daño de la membrana celular.
• Expresión tisular y celular: Su expresión en sangre periférica está altamente restringida a la superficie de las células dendríticas BDCA3+ y a un pequeño subconjunto de monocitos CD14+ y CD16−.
• Localización subcelular: CLEC9A es una proteína de membrana, consistente con su papel como receptor de superficie celular. Contiene una hélice transmembrana de paso único y una secuencia de anclaje de señal, lo que la clasifica como una proteína de membrana de tipo II.
• Características estructurales y funcionales: La proteína pertenece a la familia de lectinas tipo C y contiene puentes disulfuro y sitios de glicosilación N-enlazada, característicos de los receptores de membrana involucrados en la endocitosis. Su peso molecular es de aproximadamente 27 kDa.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 110–241 del dominio extracelular (NP_997228.1), que contiene el dominio de reconocimiento de carbohidratos. Es probable que esta región sea accesible en células vivas, lo que respalda su uso en citometría de flujo.
• Para la citometría de flujo, titule el anticuerpo para determinar la concentración óptima para su tipo de célula específico. Incluya un control de isotipo apropiado y considere usar un reactivo de bloqueo del receptor Fc para reducir la unión inespecífica.
• Dado que CLEC9A es un receptor endocítico, la unión del anticuerpo puede desencadenar la internalización. Para minimizar la posible internalización, realice los pasos de tinción a 4°C en presencia de azida sódica si es factible.
• Valide el anticuerpo en una muestra positiva conocida, como células dendríticas BDCA3+ o monocitos CD14+, para confirmar la especificidad. El patrón de expresión restringido lo convierte en un marcador útil para estudios de inmunofenotipado.

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