Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD59 humano para citometría de flujo - P13987

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CD59

• La glucoproteína CD59, también conocida como protectina, proteína inhibidora del MAC (MAC-IP), inhibidor de membrana de la lisis reactiva (MIRL) o HRF-20, es un regulador clave del sistema del complemento.
• CD59 es un potente inhibidor del complejo de ataque a la membrana (MAC) del complemento y protege las células humanas de la lisis mediada por el complemento. Se une a las horquillas beta de C8 (C8A y C8B) en el MAC en ensamblaje, formando una lámina beta intermolecular que impide la incorporación de las múltiples copias de C9 necesarias para la formación completa del poro osmótico. Referencias relacionadas: PMID:11882685, PMID:1698710, PMID:2475111, PMID:36797260
• La forma soluble de CD59, presente en la orina, conserva una actividad específica de unión al complemento, pero presenta una capacidad muy reducida para inhibir el ensamblaje del MAC en las membranas celulares.
• CD59 se localiza principalmente en la membrana celular mediante un anclaje de glucosilfosfatidilinositol (GPI), aunque también puede secretarse.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen N-glucosilación, formación de enlaces disulfuro y glucación, que contribuyen a su estabilidad estructural y función.
• Las mutaciones en CD59 están asociadas con la anemia hemolítica hereditaria.
• El splicing alternativo del gen CD59 genera múltiples isoformas.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región extracelular N-terminal de CD59 (aa 26–101), que está expuesta en la superficie celular; el conjugado es adecuado para la detección directa de CD59 nativo mediante citometría de flujo sin necesidad de un anticuerpo secundario.
• Para la citometría de flujo, titule el anticuerpo para determinar la concentración de tinción óptima para su tipo celular específico; un exceso de anticuerpo puede aumentar el fondo.
• Incluya controles de isotipo adecuados y colorantes de viabilidad para distinguir la tinción específica de membrana de la unión inespecífica a células muertas.
• La expresión de CD59 puede variar entre tipos celulares y estados de activación; valide la tinción en el sistema biológico pertinente (p. ej., células mononucleares de sangre periférica, líneas celulares tumorales) y considere la tinción conjunta con otros marcadores reguladores del complemento.

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