Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD61 humano para citometría de flujo - P05106

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la Integrina beta-3 (CD61)

• La integrina beta-3 (CD61, GPIIIa) está codificada por el gen ITGB3 y se expresa como una glicoproteína transmembrana de tipo I. El splicing alternativo produce la isoforma beta-3A (ampliamente expresada, incluidas plaquetas y osteoblastos) y la isoforma beta-3C (específica de próstata y testículos).
• Forma dos heterodímeros principales: el αIIbβ3 específico de plaquetas (ITGA2B:ITGB3), que media la agregación plaquetaria al unirse al fibrinógeno tras la activación, y el αVβ3 ampliamente expresado (ITGAV:ITGB3), que actúa como receptor para vitronectina, fibronectina, osteopontina y otras proteínas de la matriz extracelular.
  Referencias relacionadas: PMID:9111081
• La integrina αVβ3 transmite señales de factores de crecimiento (FGF1, FGF2, IGF1, IGF2, IL1B) y proteínas de la matriz, regulando la angiogénesis, la migración celular y la supervivencia.
  Referencias relacionadas: PMID:18441324, PMID:28302677, PMID:19578119, PMID:28873464, PMID:29030430
• En el sistema nervioso central, la integrina beta-3 modula la fuerza sináptica regulando la localización del transportador de serotonina y la endocitosis del receptor AMPA (Por similitud).
• ITGAV:ITGB3 funciona como receptor de entrada para varios virus, incluidos el herpesvirus humano 8, el coxsackievirus A9, el virus de Hantaan, el citomegalovirus, el metapneumovirus humano, el parechovirus humano 1 y el virus del Nilo Occidental; la proteína Tat del VIH-1 también interactúa con αVβ3 para promover la angiogénesis en el sarcoma de Kaposi.
• A nivel subcelular, la integrina beta-3 se localiza en la membrana celular, la membrana de lamelipodios, las adhesiones focales y las membranas postsinápticas, reflejando sus funciones en adhesión, migración y organización sináptica.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen enlaces disulfuro, múltiples sitios de N-glicosilación y fosforilación; une iones de calcio y magnesio esenciales para la actividad de unión al ligando.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se generó contra una proteína recombinante que abarca los aminoácidos 21-718 del CD61 humano, lo que abarca todo el dominio extracelular. Se espera que reconozca la integrina beta-3 nativa en la superficie celular.
• La conjugación directa con permite la tinción en un paso sin anticuerpos secundarios; por lo tanto, incluya los controles de isotipo apropiados y los pasos de bloqueo del receptor Fc para minimizar la unión inespecífica.
• Para citometría de flujo, titule el anticuerpo para determinar la concentración óptima para su tipo de célula y condiciones experimentales específicas; las diluciones iniciales típicas van de 1:25 a 1:200, pero el rendimiento real debe validarse empíricamente.
• Los protocolos de fijación y permeabilización deben probarse, ya que pueden alterar la accesibilidad del epítopo. Se recomienda la tinción superficial de células vivas no fijadas para obtener máxima sensibilidad.
• La expresión de la integrina beta-3 puede aumentar tras la activación plaquetaria; considere las condiciones de reposo frente a activadas en su diseño experimental.

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