Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Humano CD62E/E-Selectina para FC - P16581

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la E-selectina

• La E-selectina (CD62E) es una glucoproteína de superficie celular perteneciente a la familia de selectinas de moléculas de adhesión, codificada por el gen SELE en humanos. También se conoce como molécula de adhesión de leucocitos endoteliales 1 (ELAM-1) y molécula de adhesión de leucocitos y células endoteliales 2 (LECAM2).
• Su función principal es mediar la adhesión de neutrófilos sanguíneos al endotelio activado por citoquinas, un paso esencial en la respuesta inflamatoria. Esta interacción se produce mediante la unión a SELPLG/PSGL1 (ligando 1 de glucoproteína de P-selectina).
• Además, la E-selectina puede contribuir a la morfogénesis capilar, lo que sugiere un papel más allá de la adhesión inmune en la angiogénesis o el desarrollo vascular.
• La proteína se localiza en la membrana celular como una proteína transmembrana de tipo I, con una región extracelular que contiene un dominio de lectina de tipo C en el extremo N-terminal, un dominio similar al EGF y múltiples repeticiones sushi (CCP/SCR).
• La E-selectina se caracteriza por varios motivos estructurales clave, incluyendo sitios de unión al calcio, enlaces disulfuro y glicosilación N-ligada. Requiere iones metálicos (particularmente calcio) para el reconocimiento del ligando.
• La expresión de la E-selectina se induce típicamente en las células endoteliales por citoquinas inflamatorias como TNF-alfa e IL-1, sin expresión constitutiva en la mayoría de los tejidos, destacando su papel en la inflamación aguda.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde al dominio extracelular (aa 22-230) de la E-selectina humana, abarcando los dominios de lectina y similar al EGF. Esto sugiere que el anticuerpo probablemente se dirige a la región de unión al ligando en el extremo N-terminal, lo que lo hace adecuado para el bloqueo o la detección de la E-selectina expresada en la superficie.
• Como anticuerpo monoclonal conjugado con fluoróforo, este reactivo está listo para usar para citometría de flujo directa sin tinción secundaria. Se recomienda titular el anticuerpo para determinar la concentración de trabajo óptima para su sistema celular específico.
• La expresión de la E-selectina es inducible; considere estimular las células endoteliales (p. ej., HUVECs) con TNF-α o IL-1 durante 4-6 horas antes de la tinción para lograr niveles superficiales detectables.
• Incluya controles de isotipo apropiados y tintes de viabilidad para discriminar la unión específica y excluir las células muertas del análisis.
• Conserve el anticuerpo a 2–8°C protegido de la luz; evite ciclos repetidos de congelación y descongelación.

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