Anticuerpo Monoclonal de Conejo anti-Humano CD62E/E-Selectina para Citometría de Flujo - P16581

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la E-Selectina

• La E-selectina, también conocida como CD62E, ELAM-1 o LECAM2, es una glucoproteína de superficie celular codificada por el gen SELE. Pertenece a la familia de las selectinas de moléculas de adhesión, caracterizada por un dominio de lectina en el extremo N-terminal, un dominio tipo EGF y múltiples repeticiones sushi (proteínas de control del complemento).
• La función principal de la E-selectina es mediar la adhesión de leucocitos al endotelio activado durante la inflamación. Reconoce y se une a ligandos de carbohidratos específicos, notablemente el sialyl-Lewis X, en neutrófilos, monocitos y células T de memoria.
• La E-selectina no se expresa constitutivamente; su transcripción es inducida por citoquinas como el factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α) y la interleucina-1 (IL-1). Esta expresión estrictamente regulada asegura una respuesta de adhesión rápida y transitoria en sitios de lesión o infección.
• Más allá de su papel en la vigilancia inmune, se ha implicado a la E-selectina en la morfogénesis capilar, lo que sugiere una función en la angiogénesis y el remodelado vascular.
• La proteína es una glucoproteína transmembrana de tipo I, anclada en la membrana plasmática con sus dominios de unión a ligandos expuestos en la superficie celular. Su región extracelular contiene múltiples dominios estabilizados por enlaces disulfuro y sitios de unión a calcio.
• Las características estructurales clave incluyen un dominio de lectina de tipo C en el extremo N-terminal responsable del reconocimiento de carbohidratos dependiente de calcio, seguido de un único dominio tipo factor de crecimiento epidérmico (EGF) y seis repeticiones de consenso cortas (dominios sushi). La cola citoplasmática corta puede interactuar con el citoesqueleto y moléculas de señalización intracelular.
• La E-selectina sufre modificaciones postraduccionales, incluyendo N-glicosilación y la formación de enlaces disulfuro intracadena, los cuales son críticos para su plegamiento adecuado y actividad de unión a ligandos.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo se desarrolló utilizando un inmunógeno correspondiente a la región extracelular (aminoácidos 22-230) de la E-selectina humana, que abarca los dominios de lectina y tipo EGF. Este diseño favorece epítopos accesibles en conformaciones nativas, haciendo que el clon sea adecuado para aplicaciones de citometría de flujo.
• Para la tinción por citometría de flujo, utilice una suspensión de células únicas preparada a partir de células endoteliales activadas o poblaciones de leucocitos. Considere titular el anticuerpo para determinar la relación óptima señal-ruido para su sistema modelo específico.
• Incluya controles de isotipo apropiados y discriminación de células vivas/muertas para asegurar la especificidad. La expresión de E-selectina puede ser baja en células en reposo, por lo que se recomienda la estimulación con citoquinas (p. ej., tratamiento con TNF-α) para aumentar la expresión del objetivo.
• El conjugado es compatible con líneas láser rojas/naranjas comunes (p. ej., 561 nm o 594 nm) y puede combinarse con otros fluoróforos en paneles multicolores. Valide los ajustes de compensación de superposición espectral en su instrumento.
• Proteja siempre los anticuerpos conjugados de la luz y evite ciclos repetidos de congelación-descongelación para mantener la estabilidad del fluoróforo.

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