mAb de conejo anti-CD97 humano para FC - P48960

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD97

• El receptor acoplado a proteína G de adhesión E5 (CD97, ADGRE5) es un miembro de la familia de GPCR de adhesión, caracterizado por un gran dominio extracelular con repeticiones tipo EGF y un dominio de siete transmembranas.
• Esta proteína media tanto la adhesión celular como la señalización intracelular, y funciona principalmente en etapas tempranas después de la activación de leucocitos para regular la migración.
• CD97 cumple un papel esencial en la migración de leucocitos, facilitando el tráfico de células inmunitarias hacia los sitios de inflamación.
• Se expresa de forma amplia en la mayoría de las células hematopoyéticas, entre las que se incluyen linfocitos activados, monocitos, macrófagos, células dendríticas y granulocitos, y también es abundante en las células del músculo liso.
• El receptor se localiza en la membrana celular y también puede desprenderse en forma soluble hacia el espacio extracelular; su expresión se upregula en condiciones inflamatorias, como ocurre en la esclerosis múltiple y la artritis reumatoide.
• CD97 se expresa en diversos carcinomas (de tiroides, colorrectal, gástrico, esofágico, pancreático), lo que sugiere roles potenciales en la biología tumoral.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación y fosforilación; la proteína contiene dominios tipo EGF de unión a calcio y enlaces disulfuro críticos para su estructura.
• El empalme alternativo produce isoformas con diferentes pesos moleculares; las masas anotadas en UniProt rondan los 92 kDa, lo que refleja las formas glicosiladas.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno se diseñó usando la región extracelular (aa 21-398) del CD97 humano, que abarca los dominios tipo EGF y es probable que reconozca el receptor nativo expresado en superficie en citometría de flujo.
• Para citometría de flujo (FC), se recomienda usar una discriminación adecuada entre células vivas y muertas y el bloqueo de receptores Fc para minimizar la unión inespecífica, especialmente en muestras con alta expresión de FcγR como monocitos y macrófagos.
• Valide el anticuerpo en el sistema de muestra correspondiente (por ejemplo, PBMC humanas, líneas celulares que expresen CD97) e incluya controles adecuados para confirmar la especificidad.
• Debido a que CD97 se desprende y se presenta en forma soluble, tenga en cuenta que el CD97 soluble en la muestra (por ejemplo, suero, líquido sinovial) podría competir con la detección de la forma unida a membrana; se recomienda lavar las células exhaustivamente antes de la tinción.

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