mAb de conejo anti-CD97 humano para FC - P48960

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD97

• CD97, también conocido como receptor acoplado a proteína G de adhesión E5 o antígeno leucocitario CD97, es un miembro de la familia de GPCR de adhesión, caracterizado por un extremo N extracelular extendido que contiene múltiples repeticiones de tipo EGF.
• Funciona como un receptor involucrado tanto en la adhesión celular como en la señalización, cumpliendo un papel esencial en la migración de leucocitos.
• La proteína se expresa como isoformas transmembrana y solubles; el empalme alternativo genera variantes con diferentes números de dominios de tipo EGF.
• Localización subcelular: se encuentra principalmente en la membrana celular, pero también se secreta al espacio extracelular.
• Se expresa de forma generalizada en la mayoría de las células hematopoyéticas (linfocitos activados, monocitos, macrófagos, células dendríticas, granulocitos) y es abundante en las células del músculo liso; también se encuentra en ciertos carcinomas (tiroideo, colorrectal, gástrico, esofágico, pancreático).
• Su expresión se upregula en condiciones inflamatorias, como en el SNC de la esclerosis múltiple y el tejido sinovial de la artritis reumatoide, detectándose un aumento de CD97 soluble en el líquido sinovial.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación, enlaces disulfuro y fosforilación; el dominio extracelular contiene sitios de unión a calcio de tipo EGF.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado fue una proteína recombinante correspondiente a los aminoácidos 21-398 del CD97 humano, que abarca el dominio extracelular. Este diseño probablemente genera anticuerpos que reconocen epítopos accesibles en la superficie celular.
• Para citometría de flujo, utilice protocolos de tinción estándar con controles de isotipo adecuados; realice una titulación del anticuerpo para determinar la concentración de trabajo óptima.
• Valide la reactividad en líneas celulares hematopoyéticas o de carcinoma humanas relevantes que se sabe que expresan CD97 (por ejemplo, leucocitos, líneas de células de músculo liso).
• Tenga en cuenta que CD97 puede escindirse, por lo que el receptor soluble puede competir en ciertos ensayos; considere utilizar células frescas o bloquear con proteína recombinante si es necesario.
• No confíe en la determinación del peso molecular por western blot, ya que este anticuerpo está recomendado solo para FC; verifique la especificidad mediante tinción de células con patrones de expresión conocidos de CD97.

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