Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD99 humano para IF/ICC y FC - P14209

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización del antígeno CD99

• El antígeno CD99 (también conocido como MIC2, antígeno E2, 12E7 o glucoproteína de superficie de los linfocitos T E2) es una proteína transmembrana codificada por el gen CD99 en humanos.
• Participa en los procesos de adhesión de los linfocitos T, incluida la formación espontánea de rosetas con eritrocitos, una característica de los linfocitos T.
• CD99 desempeña un papel fundamental en la extravasación de leucocitos, facilitando el paso de los leucocitos a través de la membrana basal endotelial en una etapa tardía, de forma independiente de PECAM1.
• La proteína se localiza en la membrana plasmática (proteína de membrana de tipo I de un solo paso) con su extremo N expuesto extracelularmente.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación y fosforilación (palabras clave: glucoproteína, fosfoproteína).
• El corte y empalme alternativo genera múltiples isoformas, y la proteína forma parte del proteoma de referencia, con evidencia directa de secuenciación de proteínas.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 24-123 de CD99 humano, correspondiente a la región extracelular N-terminal. Este diseño probablemente se dirige a un epítopo expuesto, adecuado para aplicaciones de tinción de células vivas.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), se recomienda la fijación con paraformaldehído, pero puede omitirse la permeabilización si el epítopo es accesible en la superficie celular. Realice pruebas de tinción con y sin detergente para confirmarlo.
• En citometría de flujo (FC), este conjugado permite la detección directa; considere utilizar controles de isotipo adecuados y valorar el anticuerpo para obtener una relación señal/ruido óptima.
• Valide la especificidad del anticuerpo en su sistema experimental utilizando líneas celulares CD99 positivas (por ejemplo, líneas de linfocitos T) y controles CD99 negativos para confirmar una reactividad cruzada mínima.
• Dado que CD99 participa en la adhesión, asegúrese de que los métodos de recolección celular no dañen los antígenos de superficie; se recomiendan técnicas de desprendimiento suaves.

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