Anticuerpo monoclonal conejo anti-queratina 8 humana para citometría de flujo intracelular - P05787

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Queratina 8

• La Queratina 8 (K8/CK8), codificada por el gen KRT8, es una proteína de filamento intermedio de queratina tipo II que forma heteropolímeros obligatorios con su pareja tipo I KRT18 en células epiteliales simples (PubMed:26823019).
  Referencias relacionadas: PMID:26823019
• KRT8 proporciona estabilidad mecánica y resiliencia a los epitelios y protege a las células del estrés no mecánico, como la apoptosis (Por similitud).
• Es necesaria para la formación de fibras de estrés de actina mediada por ARHGEF40 y el refuerzo de las fibras de estrés inducido por fuerza tensional (PubMed:26823019).
  Referencias relacionadas: PMID:26823019
• En el músculo estriado, KRT8 y KRT19 pueden vincular el aparato contráctil a la distrofina en los costámeros (PubMed:16000376).
  Referencias relacionadas: PMID:16000376
• La localización subcelular es predominantemente en el citoesqueleto citoplasmático, pero también se detecta en el nucleoplasma y la matriz nuclear.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, fosforilación, metilación, ubiquitinación y glicosilación, que modulan su ensamblaje y función.
• Especificidad tisular: se expresa en epitelios simples (p. ej., mucosa gingival, paladar duro) y en fibras musculares en los costámeros.
• Relevancia clínica: asociada con variantes de enfermedad e interacciones huésped-virus, destacando su papel en la patología.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para citometría de flujo intracelular, fije y permeabilice las células utilizando protocolos optimizados (p. ej., PFA al 4% seguido de Tritón X-100 al 0.1% o tampones a base de saponina) para permitir el acceso del anticuerpo a la red de queratina citosólica.
• Valore el anticuerpo marcado con para determinar la concentración óptima de tinción; las diluciones iniciales típicas están entre 1:50 y 1:200, pero varían según el tipo celular.
• Utilice anticuerpos control de isotipo apropiados para establecer umbrales de selección (gating) y confirmar la especificidad de la tinción de KRT8.
• Las células HeLa u otras líneas celulares epiteliales simples (p. ej., MCF-7) pueden servir como controles positivos debido a la alta expresión de KRT8; considere usar células knockout o con silenciamiento (knockdown) como controles negativos si están disponibles.
• Proteja el anticuerpo de la exposición prolongada a la luz para evitar la fotodegradación del fluoróforo durante la tinción y la adquisición.
• El inmunógeno abarca casi toda la longitud de KRT8 (aa 1-483), lo que sugiere que el anticuerpo probablemente reconoce la conformación nativa; sin embargo, no se ha proporcionado validación para otras aplicaciones (p. ej., WB, IHC) y debe verificarse de forma independiente.

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