mAb de conejo anti-EGFR humano para IF/ICC, FC - P00533

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización del EGFR

• EGFR (receptor del factor de crecimiento epidérmico) es un miembro de la familia de receptores tirosina quinasas ErbB, también conocido como ErbB1 o HER1.
• Se une a ligandos de la familia EGF, que incluyen EGF, TGF-alfa, amfiregulina (AREG), epigen (EPGN), betacelulina (BTC), epiregulina (EREG) y el factor de crecimiento similar a EGF de unión a heparina (HBEGF), lo que induce la homodimerización o heterodimerización del receptor y la autofosforilación de residuos citoplasmáticos clave. (PubMed:10805725, PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029) Referencias relacionadas: PMID:10805725, PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• El receptor fosforilado recluta proteínas adaptadoras como GRB2, iniciando diversas cascadas de señalización descendentes, que incluyen los módulos RAS-RAF-MEK-ERK, PI3 quinasa-AKT, PLCgamma-PKC y STAT. También puede activar la vía de señalización NF-kappa-B. (PubMed:27153536, PubMed:11116146) Referencias relacionadas: PMID:27153536, PMID:11116146
• EGFR fosforila directamente a otras proteínas como RGS16 (activando su actividad GTPasa), MUC1 (potenciando su interacción con SRC y CTNNB1/beta-catenina) y CCDC88A/GIV (promoviendo la migración celular al retener al EGFR en la membrana celular). (PubMed:11602604, PubMed:11483589, PubMed:20462955) Referencias relacionadas: PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:20462955
• La isoforma 2 de EGFR puede funcionar como antagonista de la acción del EGF.
• EGFR se localiza en múltiples compartimentos celulares, incluyendo la membrana celular, la membrana del retículo endoplásmico, la membrana del aparato de Golgi, la membrana nuclear, los endosomas y el núcleo; también puede ser secretado.
• Se expresa de forma ubicua, y la isoforma 2 también se detecta en cánceres de ovario.
• En hepatocitos, EGFR actúa como receptor del virus de la hepatitis C (VHC), facilitando la entrada viral al promover la formación del complejo receptor CD81-CLDN1 y potenciar la fusión de membranas.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se dirige a un epitopo del dominio extracelular (aminoácidos 335-525), por lo que es adecuado para la detección de EGFR de superficie celular en aplicaciones con células vivas y células fijadas como la citometría de flujo y la inmunofluorescencia.
• Para citometría de flujo, recomendamos titular el anticuerpo para determinar la concentración óptima e incluir controles de isotipo adecuados para garantizar la especificidad.
• Para inmunofluorescencia, se puede utilizar una fijación suave con paraformaldehído seguida de permeabilización con Tritón X-100 o metanol; sin embargo, la detección de EGFR de superficie puede no requerir permeabilización.
• Dado que la reactividad cruzada solo ha sido validada para el EGFR humano, los usuarios deben verificar la reactividad en otras especies o tipos de muestra de interés.
• Al igual que con cualquier anticuerpo recombinante, realice comprobaciones de consistencia entre lotes y valídelo en el sistema de ensayo previsto.

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