Anticuerpo monoclonal de conejo anti-HER2/ErbB2 humano para citometría de flujo - P04626

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de HER2/ErbB2

• HER2/ErbB2 es una proteína quinasa receptora de tirosina que funciona en complejos de receptores de superficie celular, y requiere un correceptor para la unión al ligando. Es un componente esencial del complejo receptor de neuregulina, aunque las neuregulinas no interactúan directamente con él.
• Esta proteína regula el crecimiento y la estabilización de microtúbulos a través del eje de señalización MEMO1-RHOA-DIAPH1, que inhibe a GSK3B y promueve la localización en membrana de APC y MACF1, elementos críticos para la captura de microtúbulos.
• En el núcleo, HER2 actúa como regulador transcripcional: se une al promotor de PTGS2/COX-2 para activar la transcripción, y participa en la activación transcripcional de CDKN1A junto con STAT3 y SRC.
• También participa en la transcripción del gen ARN ribosomal por la ARN polimerasa I, mejorando de esta forma la síntesis de proteínas y el crecimiento celular.
• Subcelularmente, HER2 se localiza en la membrana celular, membrana de pliegues celulares, endosomas tempranos, citoplasma (región perinuclear) y núcleo, lo que refleja su doble función de señalización y transcripcional.
• Se observa expresión en una gran variedad de tejidos tumorales, incluyendo cáncer primario de mama, intestino delgado, esófago, riñón y oral, lo que resalta su importancia oncogénica.
• Sus características estructurales clave incluyen un péptido señal, un dominio extracelular grande, una hélice transmembrana simple y un dominio tirosina quinasa intracelular. Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación, glicosilación y formación de enlaces disulfuro.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo es adecuado para citometría de flujo (CF) y reconoce el dominio extracelular del HER2 humano. Utilice líneas celulares HER2 positivas adecuadas (por ejemplo, SK-BR-3, BT-474) como control positivo, y líneas HER2 negativas (por ejemplo, MCF-7) como control negativo.
• Para la tinción de superficie celular, recolecte células vivas y realice la tinción sin fijación ni permeabilización para preservar el epítopo extracelular. Incluya un control de isotipo y bloqueo de Fc para minimizar la unión no específica.
• Realice una titulación del anticuerpo para determinar la concentración óptima para sus condiciones de ensayo específicas; las concentraciones iniciales típicas van de 0,1 a 1 µg por muestra.
• Dado que el inmunógeno abarca los aminoácidos 23 al 652, el anticuerpo podría no detectar isoformas que carezcan de esta región o que presenten truncamientos N-terminales. Valide la expresión en su sistema celular objetivo si utiliza isoformas alternativas.
• Proteja el conjugado de la exposición prolongada a la luz para mantener la estabilidad de la fluorescencia. Almacene el anticuerpo según las recomendaciones y evite ciclos repetidos de congelación y descongelación.

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