Anticuerpo monoclonal de conejo anti-IgG humana (Fc) para citometría de flujo - P01857

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la región Fc de la IgG humana (IGHG1)

• IGHG1 codifica la región constante de la cadena pesada gamma-1 de la inmunoglobulina, un componente clave de los anticuerpos IgG1. Esta región define el isotipo y media las funciones efectoras a través del fragmento Fc. Referencias relacionadas: PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• Las moléculas de IgG1 son glucoproteínas secretadas o receptores unidos a la membrana en las células B. En la inmunidad humoral, la Ig unida a la membrana actúa como receptor de las células B y, tras la unión al antígeno, desencadena la activación de las células B y su diferenciación en células plasmáticas que secretan anticuerpos. Referencias relacionadas: PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• La región Fc interactúa con los receptores Fc de las células inmunitarias innatas y con C1q del complemento, desencadenando la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC), la fagocitosis dependiente de anticuerpos, la citotoxicidad dependiente del complemento (CDC) y respuestas inflamatorias. Referencias relacionadas: PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• El locus de la cadena pesada de la inmunoglobulina experimenta recombinación V(D)J, hipermutación somática y recombinación de cambio de clase para generar repertorios diversos de anticuerpos, siendo la IgG1 el subtipo más abundante en el suero humano.
• La proteína contiene dominios de inmunoglobulina conservados, estabilizados mediante enlaces disulfuro, y presenta glucosilación N en Asn-180, lo cual es fundamental para el plegamiento adecuado y la unión a los receptores Fc.
• A nivel subcelular, la IgG1 está anclada a la membrana mediante un dominio transmembrana en la superficie de las células B o se secreta como un anticuerpo soluble; la región Fc media el transporte a través de las barreras epiteliales mediante el receptor Fc neonatal.
• IGHG1 se encuentra en el cromosoma 14, dentro del locus de la cadena pesada de la Ig, y se expresa específicamente en células B y células plasmáticas; su región constante se intercambia durante el cambio de clase desde IgM/IgD.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 100-330 de la región Fc de la IgG1 humana, abarcando los dominios CH2 y CH3, altamente conservados entre los alotipos de IgG1. Asegúrese de utilizar controles adecuados, como controles de isotipo IgG, al emplear este anticuerpo en citometría de flujo.
• La concentración de trabajo habitual para citometría de flujo debe optimizarse mediante titulación; considere utilizar entre 0,5 y 5 µg por ensayo para sangre total humana o células mononucleares de sangre periférica (PBMC).
• Este anticuerpo es específico para la región Fc de la IgG humana; evalúe la reactividad cruzada con otras especies si se planean experimentos multiespecie. No se une a los fragmentos Fab.
• Para minimizar el fondo mediado por los receptores Fc, prebloquee las células con suero humano o con un bloqueador Fc antes de la tinción.
• Utilice fijación con paraformaldehído fresco (0,5-1 %) después de la tinción para preservar la fluorescencia; evite el metanol, ya que puede desnaturalizar la diana.

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