anticuerpo monoclonal de conejo anti-IL-1β humana para citometría de flujo intracelular - P01584

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la interleucina-1 beta

• La IL-1β (interleucina-1 beta, también conocida como catabolina) es una citocina proinflamatoria potente y un miembro de la familia de la interleucina-1. Está codificada por el gen IL1B en humanos (Gene ID: 3553).
• La IL-1β actúa como un pirógeno endógeno clave, induciendo la síntesis de prostaglandinas, la infiltración y activación de neutrófilos, la estimulación de células T y B, y la proliferación de fibroblastos y la producción de colágeno. Referencias relacionadas: PMID:3920526
• Promueve la diferenciación Th17 y actúa sinérgicamente con IL-12 para inducir la síntesis de IFN-γ en las células Th1. Referencias relacionadas: PMID:10653850
• La IL-1β contribuye a la angiogénesis al inducir la producción de VEGF en sinergia con TNF e IL-6. Referencias relacionadas: PMID:12794819
• Tras la activación del inflamasoma y la piroptosis, la IL-1β madura se libera a través de los poros de gasdermina-D (GSDMD), desempeñando un papel crítico en la transmisión de la inflamación posterior a la muerte celular. Referencias relacionadas: PMID:33377178 PMID:33883744
• Durante la infección cutánea por Streptococcus pyogenes, la IL-1β actúa como sensor: es escindida y activada por la proteasa bacteriana SpeB, desencadenando una respuesta inflamatoria que limita el crecimiento bacteriano. Referencias relacionadas: PMID:28331908
• A nivel subcelular, la IL-1β se encuentra en el citoplasma, el citosol y los lisosomas, y se secreta al espacio extracelular, incluso mediante exosomas.
• Se expresa principalmente a nivel proteico en monocitos y macrófagos activados.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la IL-1β madura (aa 117-269), lo que implica que el anticuerpo puede detectar tanto las formas precursoras como las escindidas. Para la citometría de flujo intracelular, asegúrese de realizar una fijación y permeabilización exhaustivas.
• Optimice las condiciones de permeabilización (por ejemplo, con saponina o metanol) para preservar la accesibilidad del epítopo y permitir al mismo tiempo la entrada del anticuerpo. Incluya un marcador de viabilidad para excluir las células muertas si es necesario.
• Valide el anticuerpo en su contexto celular específico mediante la estimulación con activadores conocidos del inflamasoma (por ejemplo, LPS + ATP) y la comparación con controles no estimulados.
• Realice un experimento de titulación para determinar la concentración óptima del anticuerpo, equilibrando la señal específica con el fondo en las células permeabilizadas.
• Este anticuerpo es específico para la IL-1β humana; no se espera reactividad cruzada con la IL-1β de ratón o rata según la secuencia del inmunógeno, pero debe verificarse si se utiliza en otras especies.

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