Anticuerpo monoclonal de conejo anti-IL-6R/CD126 humano para citometría de flujo (intracelular) - P08887

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de IL-6R/CD126

• La subunidad alfa del receptor de interleucina-6 (IL-6R, CD126/gp80) es una glicoproteína transmembrana que existe como una forma unida a la membrana y una isoforma soluble (sIL6R) generada por splicing alternativo y escisión proteolítica.
  Referencias relacionadas: PMID:28060820

• La IL-6R unida a la membrana se une a la interleucina-6 (IL-6) con baja afinidad; la transducción de señales requiere la asociación con el correceptor gp130 para activar las vías JAK/STAT, MAPK y otras, regulando las respuestas inmunitarias, las reacciones de fase aguda y la hematopoyesis. La señalización clásica a través de la IL-6R de membrana es predominantemente regenerativa y antiinflamatoria, con una expresión restringida principalmente a los hepatocitos y ciertos subconjuntos de leucocitos.
  Referencias relacionadas: PMID:28265003, PMID:30995492, PMID:31235509

• La IL-6R soluble (sIL6R) actúa como un agonista al formar un complejo IL-6:sIL6R que se une a gp130 en células que carecen de IL-6R de membrana, permitiendo la trans-señalización de IL-6. La trans-señalización es proinflamatoria, contribuye a las enfermedades inflamatorias crónicas, induce la producción de VEGF y regula la homeostasis de energía y glucosa en el sistema nervioso central.
  Referencias relacionadas: PMID:21990364, PMID:12794819

• En la señalización en grupo, los complejos IL-6:IL-6R unidos a la membrana en una célula activan gp130 en células adyacentes; este modo es utilizado por las células dendríticas para promover la diferenciación Th17 de células T CD4⁺ vírgenes.

• IL-6R se expresa en células mononucleares de sangre periférica y hepatocitos; sIL6R es detectable a niveles bajos en suero y orina. Aproximadamente el 1–20% de sIL6R plasmática se origina a partir del splicing alternativo.
  Referencias relacionadas: PMID:28060820

• La región extracelular contiene dominios tipo inmunoglobulina y un módulo de homología de receptor de citocinas, estabilizado por enlaces disulfuro. La proteína sufre N-glicosilación, importante para la unión del ligando y la estabilidad del receptor.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca el dominio extracelular (aa 20–358); el anticuerpo puede reconocer tanto la IL-6R unida a la membrana como sIL6R. Para la citometría de flujo intracelular, optimice la fijación y la permeabilización para capturar los reservorios de receptores intracelulares minimizando el ruido de fondo de las formas solubles.
• Recomendamos incluir controles de knockout o knockdown de IL-6R para confirmar la especificidad de la tinción en su sistema experimental.
• El conjugado directo elimina los pasos de anticuerpo secundario y reduce el tiempo del ensayo; sin embargo, se aconseja la titulación para lograr una relación señal-ruido óptima en su modelo celular específico.
• Dado que sIL6R puede estar presente en sobrenadantes de cultivo o fluidos corporales, asegure un lavado exhaustivo después de la tinción para eliminar los complejos receptor-anticuerpo solubles no unidos.

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