Anticuerpo monoclonal de conejo anti-LAMP2 humano para citometría de flujo intracelular - P13473

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de LAMP2

• LAMP2 (glucoproteína de membrana asociada a lisosomas 2, también conocida como CD107b, LGP-96) es una proteína transmembrana de tipo I muy glicosilada y miembro de la familia LAMP, que también incluye LAMP1 y LAMP3.
• LAMP2 desempeña un papel central en la biogénesis de lisosomas, la regulación del pH lisosomal y la autofagia. Inhibe directamente el canal de protones TMEM175 para facilitar la acidificación lisosomal, esencial para la actividad de las hidrolasas. Referencias relacionadas: PMID:11082038, PMID:18644871, PMID:24880125, PMID:37390818
• Media la autofagia mediada por chaperonas (CMA) al reconocer y unir proteínas citosólicas (p. ej., GAPDH, GPX4, NLRP3, MLLT11) presentadas por chaperonas como HSPA8, y dirigirlas para su degradación lisosomal. Referencias relacionadas: PMID:11082038, PMID:18644871, PMID:24880125, PMID:36586411
• LAMP2 es necesario para la fusión de autofagosomas con lisosomas durante la macroautofagia, acumulando STX17 en los autofagosomas y asegurando la degradación de la carga autofágica. Referencias relacionadas: PMID:27628032
• LAMP2 contribuye a la presentación de antígenos exógenos mediada por MHC de clase II al apoyar la proteólisis lisosomal y la carga de péptidos, pero es prescindible para la presentación de antígenos endógenos. Referencias relacionadas: PMID:15894275, PMID:20518820
• Durante la infección microbiana, LAMP2 apoya la escisión mediada por FURIN de la proteína de fusión F del virus de las paperas al interactuar tanto con FURIN como con la proteína viral no procesada.
• A nivel subcelular, LAMP2 se localiza en las membranas lisosomal, endosomal y autofagosómica, así como en la membrana celular y las vesículas citoplasmáticas.
• LAMP2 sufre splicing alternativo produciendo tres isoformas (LAMP-2A, -2B, -2C) con patrones de expresión tisular distintos: LAMP-2A es abundante en placenta, pulmón e hígado; LAMP-2B y -2C se distribuyen más ampliamente. Referencias relacionadas: PMID:26856698, PMID:7488019

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca el dominio luminal (aa 29-375) de LAMP2 humano, asegurando el reconocimiento de epítopos extracelulares/luminales expuestos en la membrana lisosomal. Para la citometría de flujo intracelular, considere permeabilizar y fijar las células para permitir el acceso del anticuerpo a los compartimentos lisosomales.
• Dada la localización de LAMP2, use controles de isotipo apropiados y valide la tinción en sistemas de muestra relevantes (p. ej., líneas celulares humanas que expresan LAMP2).
• Para la citometría de flujo multicolor, asegúrese una superposición espectral mínima con ; titre el anticuerpo para obtener una relación señal-ruido óptima.
• Este anticuerpo está validado para humano; la reactividad cruzada con otras especies no se ha probado, por lo que debe verificarlo en organismos modelo si es necesario.

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