Anticuerpo monoclonal conejo anti-humano Nectin-4 para citometría de flujo - Q96NY8

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Nectin-4

• Nectin-4, también conocido como PVRL4, LNIR y PRR4, es un receptor de la superfamilia de inmunoglobulinas codificado por el gen NECTIN4 en humanos (Gene ID 81607).
• Funciona como una molécula de adhesión celular a través de interacciones trans-homofílicas y -heterofílicas, interactuando específicamente con NECTIN1, y no sirve como receptor para la entrada de alfa-herpesvirus.
• Nectin-4 es un miembro de la familia de nectinas, que incluye cuatro miembros (nectina-1 a -4), todos contienen tres dominios de inmunoglobulina extracelulares, un único dominio transmembrana y una cola citoplasmática.
• Subcelularmente, Nectin-4 se localiza en la membrana celular, uniones celulares como las uniones adherentes, y se ha detectado una forma secretada soluble.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación y la formación de enlaces disulfuro, contribuyendo a su estabilidad estructural y función.
• Nectin-4 se expresa predominantemente en la placenta, y aunque no se detecta en el epitelio mamario normal, se expresa en carcinoma de mama, lo que indica un papel en la biología tumoral.
• Es importante destacar que Nectin-4 actúa como receptor celular para el virus del sarampión, facilitando la entrada viral en las células huésped.
• La proteína tiene un peso molecular calculado de aproximadamente 55 kDa, con isoformas potenciales (p. ej., 24 kDa) debido a empalme alternativo.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región extracelular N-terminal (aminoácidos 32–146), que incluye el primer dominio tipo Ig crítico para las interacciones del receptor; este diseño probablemente se dirige a epítopos expuestos en la superficie, haciéndolo adecuado para la detección por citometría de flujo de Nectin-4 nativo en células vivas.
• Dado que el anticuerpo está conjugado directamente con , no se requiere un anticuerpo secundario, minimizando la unión inespecífica y simplificando el protocolo de tinción para citometría de flujo.
• Para un rendimiento óptimo, valore la concentración de anticuerpo para su línea celular y experimento específicos; considere probar diluciones a partir de 1:20–1:100 para 1×10⁶ células, pero las diluciones óptimas reales deben determinarse experimentalmente.
• Dada la especificidad de tejido reportada (placenta, carcinoma de mama) y la localización subcelular (membrana y secretora), incluya controles positivos apropiados como tejido placentario, líneas celulares de carcinoma de mama (p. ej., MCF-7, T47D) y controles negativos (epitelio mamario normal o modelos de knockout/knockdown) para validar la especificidad de la tinción.
• Dado que Nectin-4 puede ser liberado como una forma secretada, en ciertos contextos experimentales (p. ej., sobrenadante o suero), el anticuerpo puede detectar Nectin-4 soluble; considere esto al analizar datos de citometría de flujo de muestras derivadas de sobrenadante de cultivo celular.
• Para la investigación del virus del sarampión, este anticuerpo se puede usar para evaluar la expresión de Nectin-4 en estudios de interacción virus-huésped; sin embargo, asegúrese de que el epítopo no esté enmascarado tras la unión viral o la entrada celular.
• Las bandas de peso molecular reportadas (24 kDa y 55 kDa) corresponden a isoformas alternativas; al realizar una validación ortogonal (p. ej., Western blot), estos tamaños pueden observarse en condiciones reductoras.

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