Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Humano RANKL/CD254 - O14788

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de RANKL/CD254

• El miembro 11 de la superfamilia de ligandos del factor de necrosis tumoral (TNFSF11), también conocido como RANKL, OPGL, ODF, TRANCE y CD254, es una proteína transmembrana de tipo II perteneciente a la familia de ligandos TNF.
• Como regulador clave del metabolismo óseo, RANKL se une a TNFRSF11A/RANK para promover la diferenciación y activación de osteoclastos, mientras que la interacción con el receptor señuelo TNFRSF11B/OPG inhibe este proceso. Induce osteoclastogénesis a través de oscilaciones de Ca²⁺ y transcripción génica mediada por NFATC1.
• RANKL puede desempeñar un papel en la resorción ósea aumentada en la hipercalcemia humoral de la malignidad, destacando su implicación en la pérdida ósea patológica. Referencias relacionadas: PMID:22664871
• Más allá del hueso, RANKL funciona en el sistema inmunitario al aumentar la proliferación de células T vírgenes impulsada por células dendríticas, lo que sugiere un papel en las interacciones células T/células dendríticas y en las respuestas inmunitarias dependientes de células T.
• Subcelularmente, RANKL se encuentra en la membrana celular con topología transmembrana, en el citoplasma, y también se secreta como una forma soluble (sRANKL) generada por empalme alternativo o desprendimiento proteolítico.
• La expresión es más alta en los ganglios linfáticos periféricos, con niveles más bajos en bazo, leucocitos de sangre periférica, médula ósea, corazón, placenta, músculo esquelético, estómago y tiroides.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación, y la proteína está asociada con procesos de desarrollo, diferenciación celular y variantes de enfermedad vinculadas a la osteopetrosis.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para citometría de flujo intracelular (FC intra), optimice los protocolos de permeabilización y fijación para garantizar el acceso del anticuerpo al RANKL citoplasmático preservando la integridad del epítopo.
• Incluya controles negativos apropiados, como un anticuerpo isotipo o células con expresión de TNFSF11 silenciada, para confirmar la especificidad de la tinción.
• Dado que RANKL puede estar unido a membrana o secretado, evalúe la expresión en líneas celulares o células primarias conocidas por expresar RANKL, como células T activadas u osteoblastos.
• Valide el rendimiento del anticuerpo en su sistema de muestra específico, ya que la accesibilidad del epítopo puede variar con las condiciones de fijación y permeabilización.

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