Anticuerpo monoclonal de conejo anti-SIGLEC9 humano para citometría de flujo - Q9Y336

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de SIGLEC9

• La lectina de tipo inmunoglobulina de unión a ácido siálico 9 (SIGLEC9, también conocida como CD329 o FOAP-9) es una molécula de adhesión putativa que media la unión dependiente de ácido siálico a las células, reconociendo preferentemente ácido siálico unido por enlaces α-2,3 o α-2,6.
• El sitio de unión al ligando puede estar enmascarado en cis por interacciones con ácidos siálicos en la misma superficie celular, modulando potencialmente la adhesión celular y la señalización.
• SIGLEC9 es un miembro de la superfamilia de las inmunoglobulinas y contiene un dominio de tipo V similar a Ig y dos dominios de tipo C2 similares a Ig, característicos de la familia de las lectinas de unión a ácido siálico.
• Se expresa en leucocitos de sangre periférica, especialmente en neutrófilos y monocitos, pero no en eosinófilos; también se encuentra en hígado, hígado fetal, médula ósea, placenta, bazo y en concentraciones más bajas en muchos otros tejidos.
• La proteína es una proteína de membrana de tipo I de paso único, con una región extracelular que contiene el sitio de reconocimiento del ácido siálico y una cola citoplasmática que puede participar en la señalización inhibitoria.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación ligada a N y formación de enlaces disulfuro, que son críticos para la estabilidad estructural y la función.
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas, y la proteína está sujeta a desprendimiento proteolítico, que puede regular su expresión superficial y generar SIGLEC9 soluble.
• Como lectina, SIGLEC9 participa en las interacciones célula-célula y la modulación inmune, y su desregulación se ha relacionado con procesos inflamatorios y autoinmunes.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se generó contra una proteína recombinante correspondiente al dominio extracelular (aminoácidos 18-348) de la SIGLEC9 humana; se espera que reconozca la forma nativa del proteína expresada en superficie.
• Para citometría de flujo, considere titular el anticuerpo para determinar la concentración de tinción óptima para su tipo celular y condiciones de ensayo, ya que un exceso de anticuerpo puede aumentar el fondo o afectar la relación señal-ruido.
• Debido al posible enmascaramiento cis de los epítopos de SIGLEC9 por ácidos siálicos en la superficie celular, se puede probar la desialilación enzimática (por ejemplo, tratamiento con neuraminidasa) para mejorar la unión del anticuerpo en ciertos montajes experimentales; sin embargo, valídelo primero en el sistema de muestras correspondiente.
• Dado que SIGLEC9 se expresa predominantemente en neutrófilos y monocitos, incluya estrategias de gating apropiadas y marcadores de linaje para confirmar la especificidad en poblaciones mixtas de leucocitos.
• Se requiere compensación de fluorescencia al usar en combinación con otros fluoróforos; utilice controles de tinción simple para establecer matrices de compensación precisas.

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