anticuerpo monoclonal de conejo anti-Syk humano para FC (intra) - P43405

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de Syk

• Syk (tirosina quinasa del bazo, p72-Syk) es una tirosina quinasa no receptora que media la transducción de señales aguas abajo de varios receptores transmembrana, incluido el receptor de células B (BCR), regulando la inmunidad innata y adaptativa, la adhesión celular y la activación plaquetaria. Referencias relacionadas: PMID:12387735, PMID:33782605

• Esencial para el desarrollo de células B, Syk es necesario para la maduración de las células B en la transición de pro-B a pre-B, y tras la participación del BCR, fosforila adaptadores clave como BLNK y BTK, iniciando múltiples cascadas de señalización aguas abajo. Referencias relacionadas: PMID:12456653

• En la inmunidad innata, Syk es activado por receptores como CLEC7A en respuesta a patógenos fúngicos, lo que conduce a la producción de ROS, la activación del inflamasoma y la transcripción de citoquinas mediada por NF-kB.

• Syk también funciona en contextos no inmunes, incluida la adhesión celular mediada por integrinas, la maduración de osteoclastos, la activación plaquetaria mediante colágeno y el desarrollo vascular. Referencias relacionadas: PMID:12387735

• A nivel subcelular, Syk reside en el citoplasma y en la membrana celular, donde se ensambla en complejos de señalización con receptores o adaptadores que contienen ITAM fosforilados.

• Syk se expresa ampliamente en tejidos hematopoyéticos, notablemente en linajes de células B desde pro-B hasta células plasmáticas, y en neutrófilos, lo que respalda su papel en las respuestas inmunes adaptativas e innatas. Referencias relacionadas: PMID:8163536, PMID:15123770

• Como quinasa con dos dominios SH2, Syk cataliza la fosforilación de tirosinas y está regulada por fosforilación y ubiquitinación; las mutaciones se asocian con trastornos inmunes y cánceres.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para la citometría de flujo intracelular, asegure una fijación y permeabilización adecuadas para permitir el acceso del anticuerpo al Syk citoplasmático y asociado a la membrana. Valide el protocolo utilizando una línea celular conocida que exprese Syk (por ejemplo, líneas de linfocitos B) y un control negativo apropiado.
• Dado que el inmunógeno corresponde a una secuencia en la región central del Syk humano (aa 251-350), este anticuerpo puede reconocer ambas isoformas (p72-Syk y p70-Syk) si el epítopo se conserva. Confirme la especificidad en su muestra mediante Western blot o espectrometría de masas si se requiere discriminación de isoformas.
• Titule el anticuerpo para obtener un índice de tinción óptimo en su sistema experimental. Considere el uso de un tinte de viabilidad para excluir las células muertas, lo que puede aumentar el fondo en los ensayos intracelulares.
• Incluya siempre un control de isotipo conjugado con el mismo fluoróforo para evaluar la unión no específica.

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