Anticuerpo monoclonal de conejo anti-TIM-3/HAVCR2 humano para citometría de flujo - Q8TDQ0

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de TIM-3/HAVCR2

• Identidad de la proteína e isoformas: El receptor celular 2 del virus de la hepatitis A (HAVCR2), también conocido como proteína 3 que contiene dominios de inmunoglobulina y mucina de las células T (TIM-3), es una glucoproteína transmembrana de tipo I perteneciente a la familia TIM de receptores inmunomoduladores.
• Punto de control inmunitario inhibidor principal: TIM-3 funciona principalmente como un receptor coinhibidor que atenúa las respuestas de las células T, promoviendo la tolerancia inmunológica y suprimiendo las respuestas autoinmunitarias y aloinmunitarias mediadas por Th1. Referencias relacionadas: PMID:14556005
• Regulación de la señalización de las células T: En las células CD8+, TIM-3 inhibe las actividades de NF-kB y NFAT inducidas por el TCR, reduciendo la secreción de IL-2, posiblemente mediante la asociación con LCK y el reclutamiento de PTPRC a la sinapsis inmunológica. Referencias relacionadas: PMID:24337741 PMID:26492563
• Interacciones con ligandos: TIM-3 se une a la galectina-9 (LGALS9) y a la fosfatidilserina (PtSer), mediando la supresión inmunitaria, la apoptosis de las células Th1 y la fagocitosis de células apoptóticas. Sin embargo, la relevancia funcional de la unión a LGALS9 ha sido objeto de debate. Referencias relacionadas: PMID:16286920 PMID:24337741 PMID:23555261
• Modulación de la inmunidad innata: Expresado en macrófagos, células dendríticas y células NK, TIM-3 regula las respuestas innatas, incluida la activación de los macrófagos y la citotoxicidad de las células NK. Referencias relacionadas: PMID:11823861 PMID:22323453 PMID:22383801
• Patrón de expresión tisular: TIM-3 se expresa predominantemente en células Th1, células T reguladoras (Treg), células dendríticas y células asesinas naturales (NK). Su expresión aumenta en infecciones crónicas como el VHC y el VIH, contribuyendo al agotamiento de las células T.
• Localización subcelular y topología: Se localiza en la membrana celular y se concentra en las uniones celulares; presenta un dominio extracelular de inmunoglobulina, una hélice transmembrana y una cola citoplasmática con residuos de tirosina conservados.
• Modificaciones postraduccionales: La proteína experimenta glicosilación ligada a N, palmitoilación y fosforilación. Los enlaces disulfuro estabilizan el dominio Ig, y la ubiquitinación puede regular su recambio.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde al dominio extracelular (aa 22–200) de TIM-3 humano, lo que garantiza el reconocimiento del receptor nativo. Considere utilizar proteína TIM-3 recombinante o células transfectadas con TIM-3 como controles positivos.
• Para la citometría de flujo, titule el anticuerpo de 0,1 a 1,0 µg por millón de células e incluya los controles de isotipo adecuados. Valide la tinción en células T humanas activadas (por ejemplo, PBMC estimuladas con anti-CD3/CD28), donde TIM-3 está sobrerregulado.
• Este anticuerpo conjugado facilita la detección directa y minimiza el fondo inespecífico de los reactivos secundarios. Utilícelo en paneles multicolor con una compensación cuidadosa, especialmente al combinarlo con otros fluoróforos de 488 nm.
• Confirme la viabilidad de las células del sustrato y evite protocolos de fijación que oculten el epítopo; se recomienda teñir células vivas.

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