mAb de conejo anti-β2 microglobulina humana para citometría de flujo - P61769

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la β2 microglobulina

• La beta-2-microglobulina (B2M) es una proteína no glicosilada de 13 kDa que actúa como cadena ligera invariante de las moléculas de MHC de clase I, esencial para la presentación de antígenos a los linfocitos T citotóxicos.
• Como miembro de la superfamilia de las inmunoglobulinas, la B2M contiene un dominio similar a la inmunoglobulina y se asocia de forma no covalente con la cadena alfa del MHC I en la superficie celular.
• La B2M se sintetiza como preproteína, se procesa a su forma madura tras la escisión del péptido señal y se expresa de forma constitutiva en diversos tejidos, lo que refleja su papel fundamental en la vigilancia inmune.
• Subcelularmente, la B2M se localiza predominantemente en la superficie celular como parte del complejo MHC I y también se encuentra en forma secretada en los fluidos corporales.
• La proteína sufre modificaciones postraduccionales que incluyen glicación, formación de enlaces disulfuro y formación de ácido pirrolidona carboxílico en el extremo N-terminal, que son importantes para su estabilidad y función.
• La EsxA de Mycobacterium tuberculosis o el complejo EsxA-EsxB aplicados de forma exógena se unen a la B2M y alteran su exportación a la superficie celular, comprometiendo potencialmente la presentación de antígenos de clase I, lo que puede representar un mecanismo de evasión inmune. Referencias relacionadas: PMID:25356553
• Las mutaciones en el gen B2M se han asociado a amiloidosis y otras enfermedades, lo que pone de relieve su importancia clínica en los trastornos de agregación proteica.

Guía experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo se genera contra un inmunógeno recombinante que abarca los aminoácidos 21-119 de la B2M humana, que incluye el dominio extracelular maduro; por lo tanto, probablemente reconoce la conformación nativa en células vivas, por lo que es adecuado para citometría de flujo.
• Para el análisis por citometría de flujo de la β2-microglobulina de superficie celular, utilice este conjugado diluido directamente en el tampón adecuado; se puede emplear un protocolo de tinción estándar para células mononucleares de sangre periférica humana o líneas celulares de linfocitos.
• Valide la concentración óptima del anticuerpo mediante titulación en el sistema experimental correspondiente e incluya controles de isotipo adecuados para garantizar la especificidad.
• Dado que la B2M es un factor soluble, se pueden analizar sobrenadantes o plasma mediante ensayos de flujo basados en microesferas; sin embargo, el rendimiento de este anticuerpo en este tipo de ensayos no se ha probado específicamente.

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