Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD4 humano/mono para citometría de flujo - P01730

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD4

• CD4 es una glicoproteína transmembrana de tipo I de 51 kDa y miembro de la superfamilia de las inmunoglobulinas, que contiene cuatro dominios extracelulares similares a inmunoglobulina, una única hélice transmembrana y una cola citoplasmática que media la transducción de señales.
• Como correceptor de las moléculas de MHC de clase II, CD4 se une simultáneamente con el receptor de linfocitos T (TCR) a los complejos péptido-MHC de clase II en las células presentadoras de antígeno, reclutando la tirosina quinasa LCK al complejo TCR-CD3 e iniciando la señalización descendente necesaria para la activación, proliferación y diferenciación de los linfocitos T auxiliares.
• Se expresa altamente en los linfocitos T auxiliares, y también está presente en otras células inmunitarias, incluyendo macrófagos, células dendríticas y células asesinas naturales, donde contribuye a la diferenciación, expresión de citocinas y migración celular.
• CD4 actúa como el receptor principal del VIH-1, permitiendo la entrada viral en las células huésped (PubMed:12089508, PubMed:16331979, PubMed:2214026). Referencias relacionadas: PMID:12089508 PMID:16331979 PMID:2214026
• La proteína Vpu del VIH-1 dirige CD4 a la degradación, disminuyendo su expresión superficial para promover la patogénesis viral (PubMed:17346169). Referencias relacionadas: PMID:17346169
• Además, CD4 funciona como receptor del herpesvirus humano 7 (HHV-7) (PubMed:7909607). Referencias relacionadas: PMID:7909607
• Las modificaciones postraduccionales de CD4 incluyen glicosilación enlazada a N, enlaces disulfuro intercatenarios, palmitoilación de la cola citoplasmática y fosforilación, que modulan su estabilidad, asociación a membrana y capacidad de señalización.

Guía experimental y consejos técnicos

• Titule el anticuerpo para determinar la concentración óptima para su experimento de citometría de flujo; un punto de partida típico es 0,1–1 µg por 1×10^6 células.
• Incluya controles de isotipo adecuados para evaluar la unión no específica y establecer los umbrales de gating.
• Evite la fijación excesiva de las células con paraformaldehído, ya que puede alterar el epítopo; si requiere fijación, utilice PFA al 2% recién preparado durante 15 min a temperatura ambiente.
• Asegúrese de obtener una suspensión de células individuales y filtre las muestras a través de un filtro celular de 70 µm antes de la adquisición para evitar obstrucciones.
• Valide la tinción en muestras biológicas relevantes (por ejemplo, PBMC humanas, linfocitos de macaco cangrejero o rhesus) para confirmar los patrones de expresión esperados.

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