Anticuerpo monoclonal conejo anti-CD4 Humano/Mono para citometría de flujo - P01730

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del CD4

• CD4 es una glicoproteína transmembrana tipo I de 51 kDa perteneciente a la superfamilia de las inmunoglobulinas, expresada en la superficie de células T colaboradoras, macrófagos, células dendríticas y células NK como un sello distintivo de los linfocitos T colaboradores.
• Como correceptor, CD4 se une a moléculas del MHC de clase II en células presentadoras de antígeno, interactuando simultáneamente con el receptor de células T (TCR) para reclutar la quinasa Src LCK, lo que inicia cascadas de señalización que conducen a la activación de células T, producción de citoquinas y diferenciación.
• En el timo, CD4 participa en la selección positiva y el compromiso de linaje de las células T colaboradoras CD4+, esenciales para la inmunidad adaptativa.
• CD4 sirve como receptor primario para el VIH-1, mediando la entrada viral en las células huésped; posteriormente es regulado a la baja por la proteína accesoria Vpu del VIH-1 para ayudar a la evasión inmune. Referencias relacionadas: PMID:12089508, PMID:16331979, PMID:2214026, PMID:17346169
• CD4 también actúa como receptor celular para la entrada del herpesvirus humano 7 (HHV-7). Referencias relacionadas: PMID:7909607
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación N-ligada, formación de enlaces disulfuro en sus dominios extracelulares tipo Ig, y palmitoilación en un residuo de cisteína citoplasmática, lo que modula la localización en la membrana y la señalización.
• La proteína se localiza predominantemente en la membrana plasmática a través de una hélice transmembrana de paso único, con su región extracelular organizada en cuatro dominios tipo inmunoglobulina (D1–D4) críticos para las interacciones con ligandos.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado para generar este anticuerpo es una proteína recombinante de CD4 humano; por lo tanto, el anticuerpo reconoce epítopos dependientes de la conformación nativa y es adecuado para tinción de superficie en citometría de flujo.
• Para aplicaciones de FC, valore el anticuerpo utilizando células mononucleares de sangre periférica (PBMC) humanas o de cynomolgus para determinar la concentración óptima. Incluya controles de isotipo apropiados y realice bloqueo de receptores Fc si es necesario.
• Se puede considerar la tinción de sangre total o de suspensiones celulares individuales de tejido linfoide, siguiendo protocolos estándar con anticoagulantes y colorantes de viabilidad apropiados.
• Los pasos de fijación y permeabilización deben validarse, ya que pueden alterar la accesibilidad del epítopo; para tinción intracelular, utilice protocolos optimizados para antígenos de membrana.
• Asegúrese de que la configuración de compensación del instrumento esté correctamente calibrada para el fluoróforo para evitar solapamiento espectral, particularmente en paneles multicolor.

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