Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Ki67 humano/de mono para citometría de flujo (intracelular) - P46013

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de Ki67

• La proteína Ki-67, marcador de proliferación codificado por el gen MKI67, también se conoce como antígeno KI-67, MIB-1, KIA y PPP1R105.
• Actúa como organizador de los cromosomas mitóticos: funciona como repelente cromosómico durante la mitosis temprana para mantener la dispersión de los cromosomas individuales, y como atrayente cromosómico durante la mitosis tardía para promover la agrupación de los cromosomas (PubMed:27362226, PubMed:32879492, PubMed:35513709). Referencias relacionadas: PMID:27362226 PMID:32879492 PMID:35513709
• Forma una estructura extendida similar a un cepillo en la superficie de los cromosomas, proporcionando una barrera estérica y electrostática que evita el colapso cromosómico; durante la anafase, la desfosforilación desencadena una separación de fases líquido-líquido dependiente del ARN para promover la agrupación de los cromosomas (PubMed:27362226, PubMed:32879492, PubMed:39153474). Referencias relacionadas: PMID:27362226 PMID:32879492 PMID:39153474
• Se une al ADN con preferencia por el ADN superenrollado y rico en AT, y también se une al ARN ribosómico prematuro durante la anafase, facilitando la separación de fases (PubMed:10878551, PubMed:28935370, PubMed:39153474). Referencias relacionadas: PMID:10878551 PMID:28935370 PMID:39153474
• Localización subcelular: reside en el nucléolo durante la interfase; se relocaliza en la superficie de los cromosomas mitóticos durante la mitosis.
• Está sujeto a modificaciones postraduccionales, incluidas la fosforilación, la acetilación y la ubiquitinación, que regulan su función y su dinámica dependiente del ciclo celular.
• Se designa como marcador de proliferación debido a su patrón de expresión dependiente del ciclo celular.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a la región C-terminal (aa 2271-2370) de Ki67 humano. Confirme que el epítopo sea accesible en su protocolo de tinción intracelular.
• Este anticuerpo está conjugado directamente con para la citometría de flujo intracelular en un solo paso. Optimice las condiciones de fijación y permeabilización para su tipo celular a fin de preservar el epítopo de Ki67 y garantizar al mismo tiempo el acceso del anticuerpo al núcleo.
• La reactividad cruzada con el mono macaco cangrejero (Macaca fascicularis) sugiere su idoneidad para estudios con primates no humanos; valide la reactividad cruzada en su sistema modelo específico.
• Ki67 es una proteína nuclear grande (peso molecular previsto de aproximadamente 359 kDa), por lo que debe garantizar una permeabilización adecuada y considerar el uso de una tinción nuclear de contraste para la selección de poblaciones.
• Para el análisis cuantitativo de la proliferación, combínelo con un colorante del contenido de ADN (por ejemplo, yoduro de propidio) en un ensayo de citometría de flujo bivariante.

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