Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Ki67 humano/de mono para citometría de flujo - P46013

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de Ki67

• Ki67 es una proteína nuclear ampliamente utilizada como marcador de proliferación, con dos isoformas de aproximadamente 319 kDa y 359 kDa debido al corte y empalme alternativo.
• Durante la mitosis temprana, Ki67 se relocaliza desde los nucléolos hacia la superficie de los cromosomas, formando una estructura similar a un cepillo que evita la agregación cromosómica mediante repulsión estérica y electrostática, garantizando el movimiento independiente de los cromosomas. Referencias relacionadas: PMID:27362226
• En la anafase, la desfosforilación desencadena un cambio funcional: Ki67 colapsa en una fase condensada que atrae los cromosomas entre sí, facilitando la reformación de la envoltura nuclear y la exclusión de partículas citoplasmáticas. Referencias relacionadas: PMID:32879492 PMID:39153474
• Ki67 se une a ARN ribosómicos prematuros durante la anafase, promoviendo la separación de fases líquido-líquido en la superficie de los cromosomas, lo cual es fundamental para la agrupación cromosómica. Referencias relacionadas: PMID:28935370 PMID:39153474
• La proteína también se une al ADN con preferencia por secuencias superenrolladas y ricas en AT, aunque su función directa en la organización de la cromatina sigue sin estar clara. Referencias relacionadas: PMID:10878551
• Localización subcelular: Ki67 se encuentra predominantemente en el nucléolo durante la interfase, se asocia con los cromosomas en condensación durante la mitosis y recubre toda la superficie cromosómica.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación, acetilación y ubiquitinación, que regulan sus funciones mitóticas y su estabilidad.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 2271-2370 de Ki67 humano, ubicado en la región C-terminal. Asegúrese de que el epítopo diana sea accesible en las condiciones de fijación y permeabilización previstas.
• Para la citometría de flujo intracelular (FC intra), utilice tampones de permeabilización compatibles con antígenos nucleares. Incluya controles de isotipo apropiados y valide la tinción en una línea celular proliferante conocida (por ejemplo, HeLa o Jurkat) frente a un control no proliferante.
• Se ha informado de reactividad cruzada con el mono cynomolgus; verifíquela en su sistema experimental específico si trabaja con otras especies.
• El fluoróforo conjugado es un sustituto de Pacific Blue/eFluor 450; asegúrese de la compatibilidad con el instrumento y evite la exposición prolongada a la luz.

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