Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Megalin/LRP2 para IF-P y FC (intra) - P98164

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de Megalin/LRP2

• Megalin (LRP2) es una glucoproteína transmembrana de tipo I de ~521 kDa, perteneciente a la familia de receptores de lipoproteínas de baja densidad, caracterizada por múltiples repeticiones de unión a ligandos, dominios tipo EGF y una cola citoplasmática corta.
• Funciona como un receptor endocítico multiligando, mediando la internalización y degradación lisosomal de diversos ligandos, incluyendo lipoproteínas, complejos transportadores de vitaminas, hormonas, enzimas y fármacos, a menudo en asociación con cubilina (CUBN).
• En el riñón, la megalin es crítica para la reabsorción tubular de proteínas filtradas; media la captación de metales pesados unidos a metalotioneína (p. ej., cadmio, mercurio), la proteína antiapoptótica survivina/BIRC5, complejos de vitamina D3/GC-DBP, mioglobina y metaloproteinasas de la matriz, preservando así la función renal. Referencias relacionadas: PMID:15126248, PMID:23825075
• En el sistema nervioso central, la megalin transporta leptina a través de la barrera hematoencefálica, participa en el aclaramiento y transcitosis de la sonic hedgehog (SHH) y facilita la captación de folato esencial para el cierre del tubo neural; también media el aclaramiento de beta-amiloide y apoya la neurogénesis modulando la señalización BMP.
• Megalin se localiza principalmente en la membrana plasmática apical de epitelios absortivos polarizados, como las células del túbulo proximal renal, y sufre endocitosis mediada por clatrina hacia endosomas.
• La expresión tisular es prominente en la placenta (citotrofoblastos del primer y tercer trimestre) y túbulos renales proximales, según lo confirmado por análisis a nivel de proteína. Referencias relacionadas: PMID:27798286
• Otras funciones fisiológicas incluyen la captación en tejidos reproductivos de andrógenos/estrógenos unidos a la globulin transportadora de hormonas sexuales (SHBG), el mantenimiento de la función auditiva y el desarrollo cardíaco embrionario.
• La proteína está sujeta a unión de calcio, fosforilación y glicosilación extensa, y las mutaciones en LRP2 se asocian con el síndrome de Donnai-Barrow y la sordera.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca la región citoplasmática C-terminal (aa 4446–4655), lo que puede permitir la detección de formas completas y ciertas formas procesadas de LRP2 en estados desnaturalizados y nativos.
• Para inmunofluorescencia en tejidos incluidos en parafina (IF-P), considere un paso de recuperación de antígeno inducida por calor con un tampón de citrato a pH 6.0 para una exposición óptima del epítopo.
• Para citometría de flujo intracelular (FC), la fijación y permeabilización son obligatorias; se recomiendan titulaciones piloto (p. ej., 0.5–5 µg/mL) en el tipo de célula relevante para determinar la concentración óptima de tinción.
• Aunque validado para IF-P y FC, este anticuerpo monoclonal puede funcionar en otras aplicaciones; se aconseja verificación independiente, especialmente dada el gran tamaño y estructura compleja de la megalin.
• La reactividad cruzada con la megalin de ratón y rata sugiere secuencias de epítopo conservadas; sin embargo, los usuarios deben confirmar la reactividad en su sistema de tejido o célula específico.

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