Anticuerpo monoclonal de conejo anti-ratón CD22 para IF-P y FC - P35329

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD22

• CD22 (Siglec-2, BL-CAM) es la lectina inmunoglobulina similar de unión a ácido siálico (siglec) más expresada en los linfocitos B y es fundamental para la diferenciación de linfocitos B, la presentación de antígenos y la migración a la médula ósea. Referencias relacionadas: PMID:7533044 PMID:9016707
• Funciona como un correceptor inhibidor que atenúa la señalización del receptor de linfocitos B (BCR) al reclutar la tirosina fosfatasa PTPN6/SHP-1 tras la fosforilación de sus motivos ITIM por LYN, lo que conduce a una reducción de la movilización de calcio y la activación celular. Referencias relacionadas: PMID:9016707
• CD22 se une a residuos de ácido siálico enlazados α2,6 en sí mismo y en otras moléculas de superficie como CD45 e IgM en cis, y también actúa como molécula de adhesión celular a través de interacciones trans con ligandos en otras células.
• La proteína es una glicoproteína transmembrana de tipo I perteneciente a la familia siglec de lectinas similares a inmunoglobulinas, caracterizada por un dominio Ig de conjunto N-terminal V y múltiples repeticiones Ig de conjunto C2.
• Se producen múltiples isoformas por empalme alternativo, con pesos moleculares observados de alrededor de 89, 93 y 97 kDa, lo que coincide con la forma completa reportada de 97 kDa y las posibles variantes de empalme.
• CD22 se expresa específicamente en linfocitos B y se localiza en la membrana celular, donde se desplaza entre la superficie celular y los compartimentos intracelulares.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación enlazada a N, fosforilación en residuos de tirosina dentro de los motivos ITIM y similares a ITIM, y formación de enlaces disulfuro.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno se deriva de la región extracelular (aa 22-151) de CD22 de ratón, por lo que este anticuerpo es adecuado para detectar CD22 expuesto en la superficie en células no permeabilizadas.
• Para citometría de flujo (FC), se recomienda titular el anticuerpo en líneas celulares B de ratón relevantes o esplenocitos primarios para determinar la concentración óptima de tinción y minimizar el fondo.
• En inmunofluorescencia en tejidos embebidos en parafina (IF-P), optimice las condiciones de recuperación de antígenos, ya que el epítopo puede estar parcialmente enmascarado por la fijación con formalina, e incluya controles adecuados (por ejemplo, células negativas para CD22).
• El colorante conjugado es compatible con los canales de detección estándar de rojo/naranja; asegure la separación espectral si realiza multiplexación con otros fluoróforos.
• CD22 es un marcador de linfocitos B bien validado; este anticuerpo se puede usar para identificar poblaciones de linfocitos B en tejidos de ratón, pero no se ha probado la reactividad cruzada con otras especies además de ratón.

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