Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD28 de ratón para citometría de flujo - P31041

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CD28

• CD28 es una glucoproteína de superficie específica de las células T que funciona como un receptor coestimulador esencial para la activación, proliferación y supervivencia de las células T, así como para el mantenimiento de la homeostasis inmunitaria (PubMed:7688139). Referencias relacionadas: PMID:7688139
• Actúa como un amplificador de las señales del receptor de células T (TCR) y transmite señales intracelulares únicas que modifican el programa de expresión génica de las células T.
• Tras la interacción con sus ligandos CD80 (B7-1) o CD86 (B7-2), CD28 aumenta la producción de múltiples citocinas, principalmente IL-2, tanto en los subconjuntos de células T CD4+ como CD8+.
• La señalización implica el reclutamiento de la proteína quinasa C-theta (PRKCQ) y GRB2, lo que conduce a la activación de NF-kappa-B a través de vías dependientes e independientes de PI3K/Akt.
• Junto con la ligación de TCR/CD3 y la coestimulación de CD40L, CD28 promueve la producción de IL-4 e IL-10 en las células T.
• CD28 se localiza en la membrana celular y es una proteína transmembrana de tipo I de un solo paso que contiene un dominio extracelular de tipo V similar a una inmunoglobulina.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glucosilación ligada a N, formación de enlaces disulfuro y fosforilación, que regulan su expresión en la superficie y sus funciones de señalización.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aminoácidos 20–149) abarca el dominio extracelular, por lo que este anticuerpo monoclonal es adecuado para detectar CD28 nativo en la superficie celular mediante citometría de flujo.
• Para FC, realice una titulación del anticuerpo conjugado con para determinar la concentración óptima de tinción e incluya un control de isotipo para evaluar la unión inespecífica.
• presenta máximos de excitación/emisión de aproximadamente 650/665 nm; asegúrese de realizar una compensación adecuada al combinarlo con otros fluoróforos (por ejemplo, PE y FITC) en paneles multicolor.
• Valide la tinción en líneas celulares de células T de ratón conocidas como CD28-positivas o en esplenocitos primarios activados, y considere la fijación/permeabilización si también se analizan dianas intracelulares.

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