Anticuerpo monoclonal de conejo anti-ratón CD5 para citometría de flujo - P13379

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización del CD5

• El CD5 es un receptor específico de linfocitos expresado en todas las células T y en el subconjunto B1a de células B, desempeñando un papel en la regulación de la señalización del TCR/BCR, la selección de timocitos y la tolerancia inmunitaria. Referencias relacionadas: PMID:35720357
• Interactúa con los ligandos de células B CD5L y CD72, mediando la ayuda de las células T dependiente del contacto para las células B y manteniendo la homeostasis reguladora de las células T/B. Referencias relacionadas: PMID:24950378, PMID:9064341, PMID:9723705
• El CD5 funciona como un regulador negativo de la señalización del TCR durante el desarrollo de los timocitos al reclutar proteínas de señalización como LCK, CD3ζ, PI3K y CBL. Referencias relacionadas: PMID:11157848
• La co-implicación del CD5 con CD3 promueve la fosforilación de CBL y la degradación de VAV1, atenuando la señalización descendente (por similitud).
• En las células B1a, el CD5 modula la activación de las células B a través de la entrada de Ca²⁺ mediada por TRPC1, lo que conduce a la activación de ERK1/2 y la producción de IL-10 (por similitud).
• La proteína se localiza en la membrana celular como una glicoproteína transmembrana de tipo I de un solo paso con repeticiones ricas en cisteína del receptor scavenger extracelular, una hélice transmembrana y una cola citoplasmática que contiene sitios de fosforilación.
• El CD5 también se conoce como Ly-1, Ly-A, Ly-12 o Lyt-1 y sirve como marcador pan-T y marcador de células B1a en ratones.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 25-371 del CD5 de ratón, correspondiente a todo el dominio extracelular, lo que permite el reconocimiento del CD5 superficial nativo en células viables sin permeabilización.
• Para la citometría de flujo, realice una serie de diluciones (p. ej., 1:25 – 1:200) para determinar la concentración óptima de tinción para su muestra celular.
• Utilice anticuerpos de control de isotipo coincidentes apropiados e incluya colorantes de viabilidad para discriminar células vivas/muertas y minimizar el fondo.
• Proteja el anticuerpo de la luz durante la tinción y el almacenamiento, ya que la exposición repetida puede reducir la fluorescencia de .
• Los protocolos de tinción estándar recomiendan incubar 10⁶ células en 100 µL de tampón de tinción durante 20–30 minutos sobre hielo en la oscuridad, seguido de lavado.
• Este anticuerpo es específico para el CD5 de ratón; no se ha informado reactividad cruzada con otras especies; se aconseja la validación en su tejido objetivo.

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